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磺胺氯吡嗪钠(Sulfachlorpyrazine, SPZ)属于磺胺类广谱抗菌药,在兽医临床上主要用于球虫病的治疗,此外还可用于球虫病爆发时继发禽伤寒、禽霍乱的防治。随着磺胺氯吡嗪钠在临床的广泛应用,目前球虫对磺胺氯吡嗪钠耐药性较严重。二甲氧苄啶(Diaveridine, DVD)为动物专用抗菌增效剂,与磺胺氯吡嗪钠合用能使磺胺氯吡嗪钠的抗菌效力增强,呈现杀菌作用,而且可减少耐药菌株的产生。本研究旨在通过对磺胺氯吡嗪钠-二甲氧苄啶溶液在鸡体内的残留消除规律进行研究,确定该药物在鸡体内的休药期,为磺胺氯吡嗪钠-二甲氧苄啶溶液临床合理用药提供参考。1、鸡组织中磺胺氯吡嗪和二甲氧苄啶残留量的HPLC检测鸡组织中磺胺氯吡嗪采用乙腈和丙酮提取,正己烷脱脂,MCX固相萃取小柱净化,流动相为乙腈/0.017mol/L磷酸水溶液(32/68,v/v),紫外检测器检测,外标法定量。检测结果表明,磺胺氯吡嗪在0.04～8mg/L浓度范围内,线性关系良好(R2=0.9999)；检测限为0.02mg/kg,定量限为0.04mg/kg;磺胺氯吡嗪在0.04mg/kg、1.0mg/kg、8.0mg/kg添加浓度范围内,平均回收率84.56%～95.10%,批内变异系数1.88%～8.39%,批间变异系数1.10%～7.88%。本实验建立的鸡组织中磺胺氯吡嗪残留量的提取、净化和检测方法能满足鸡组织中磺胺氯吡嗪残留量的检测要求。鸡组织中二甲氧苄啶采用乙腈和丙酮提取,正己烷脱脂,MCX固相萃取小柱净化,流动相为乙腈/0.01mol/L磷酸二氢钾溶液(13/87,v/v),紫外检测器检测,外标法定量。检测结果表明,二甲氧苄啶在0.05～10mg/L浓度范围内,线性关系良好(R2=0.9998)；检测限为0.03mg/kg,定量限为0.05mg/kg;二甲氧苄啶在0.05mg/kg、1.0mg/kg、8.0mg/kg添加浓度范围内,平均回收率83.83%～94.05%,批内变异系数2.37%～7.46%,批间变异系数1.33%-6.07%。本实验建立的鸡组织中二甲氧苄啶残留量的提取、净化和检测方法能满足鸡组织中二甲氧苄啶残留量的检测要求。2、磺胺氯吡嗪钠-二甲氧苄啶溶液在鸡的残留消除研究36只健康白羽肉鸡,磺胺氯吡嗪钠-二甲氧苄啶溶液以临床推荐剂量的高限给药,连续饮水给药7d。停药后分别于4h(即零休药期)、1d、3d、5d、7d、9d共6个时间点进行采样。利用建立的检测鸡组织中磺胺氯吡嗪和二甲氧苄啶残留量的HPLC法,测定该药在鸡组织中的标示残留物——磺胺氯吡嗪和二甲氧苄啶的残留量。停药后4h磺胺氯吡嗪在鸡各组织中的残留量以肾脏最高,达到(2.629±2.066)μg/g,其次为皮脂和肝脏,残留量分别为(0.831±0.694)μg/g和(0.364±0.241)μg/g,肌肉中最低为(0.328±0.316)μg/g。停药后4h二甲氧苄啶在鸡各组织中的残留量以肾脏最高,达到(1.995±0.625)μg/g,依次为肝脏和皮脂,残留量分别为(0.810±0.523)gg/g和(0.266±0.135)μg/g,肌肉中最低为(0.196±0.105)μg/g。研究表明：停药后磺胺氯吡嗪在肌肉和肝脏中消除最快,在肾脏和皮脂中消除最慢,说明肾脏和皮脂是磺胺氯吡嗪的残留靶组织,磺胺氯吡嗪在肌肉、肝脏、肾脏、皮脂组织中的残留量分别于停药后3d、3d、5d、5d时降至MRL以下；停药后二甲氧苄啶在肝脏中消除最快,在肾脏中消除最慢,说明肾脏是二甲氧苄啶的残留靶组织,二甲氧苄啶在肌肉、肝脏、肾脏、皮脂组织中的残留量分别在停药后3d、1d、7d、5d时降至MRL以下。根据磺胺氯吡嗪、二甲氧苄啶的MRL,将实测数据采用WT1.4计算软件拟合。结果显示,磺胺氯吡嗪在肾脏和皮脂中的休药期较长,分别为8.82d和8.93d,休药时间基本一致。二甲氧苄啶在肾脏中的休药期则最长,为7.79d。有鉴于此,磺胺氯毗嗪钠-二甲氧苄啶溶液按推荐剂量饮水给药控制鸡球虫病,建议休药期可定为9d。