【摘 要】
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主要括以下工作:(1)采用RT-PCR法从猪囊尾蚴中扩增和克隆了副肌球蛋白全长cDNA编 码区,测序表明,其核苷酸序列与文献报道的澳大利亚株有99.8的同源性,氨基酸序列有99.3.(2)分
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主要括以下工作:(1)采用RT-PCR法从猪囊尾蚴中扩增和克隆了副肌球蛋白全长cDNA编 码区,测序表明,其核苷酸序列与文献报道的澳大利亚株有99.8的同源性,氨基酸序列有99.3.(2)分别构建了副肌球蛋白的原核和真核表达载体.分别在E.colik802和COS7细胞中 表达,Western-blot和ELTST检测显示获得表达.(3)构建了人IL-2重组质粒,体外传染COS7细胞,使其获得表达.细胞因子活性检测结果显示,表达的IL-2有较好的生物学活性.(4) 核酸疫苗免疫小鼠后,在小鼠体内诱发了全面的免疫应答.血清中IgG水平在第8周达到高 峰,IgG<,2a>在第四周达到高峰;细胞因子检测表明TH<,1>应答占优势.TH细胞在体外特异抗原刺激时,增殖活跃.IL-2真核表达质粒增强了免疫应答反应.(5)副肌球蛋白核酸疫苗 对仔猪的相对保护性率为66.6,IL-2联全免疫使仔获得的相对保护率为88.38.上述结果 表明(1)副肌球蛋白是一种免疫保护性抗原,该抗原的核酸疫苗在动物体内可诱导免疫应答,并使仔猪在攻击实验中获得保护.(2)质粒DNA自身具有佐剂功能,免疫刺激序列有利于增 强免疫应答.(3)IL-2重组质粒可增强动物的免疫的应.
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