【摘 要】
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姜黄素——姜黄的主要活性化合物，具有抗炎、抗氧化等广泛的生物活性，且已被报道具有神经保护作用。然而，迄今为止，其相关的作用机制仍不清楚。本研究着重探讨在体外培养的大鼠海
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姜黄素——姜黄的主要活性化合物，具有抗炎、抗氧化等广泛的生物活性，且已被报道具有神经保护作用。然而，迄今为止，其相关的作用机制仍不清楚。本研究着重探讨在体外培养的大鼠海马神经元中，姜黄素对L-型Ca2+通道电流的选择性地抑制作用。 方法:大鼠海马神经元制备和原代细胞培养;使用10mM的钡离子作为电荷载体，利用膜片钳技术记录大鼠海马神经元的全细胞电流;免疫印迹法检测大鼠海马神经元中蛋白激酶C(PKC)的分型;对大鼠海马神经元中蛋白激酶A(PKA)活性的测定;小片段干扰核糖核酸(siRNA)转染大鼠海马神经元后，进行全细胞膜片钳技术分析。 结果:姜黄素浓度依赖性的可逆地抑制高电压门控Ca2+通道电流(IBa)，但经特定的L-型Ca2+通道阻断剂——nifedipine处理后，姜黄素对细胞无明显影响;姜黄素对L-型Ca2+通道的激活无显着影响，但能够使L-型Ca2+通道的失活曲线向超极化方向移动;经典PKC拮抗剂GF109203X和新型PKC拮抗剂CalphostinC预处理能完全阻滞姜黄素诱导IBa抑制的作用，而经典的PKC拮抗剂G(o)6976或抑制PKA活性并没有该作用;此外，在体外培养的大鼠海马神经元中，细胞内的应用PKC-θ的抑制肽PKC-θ-IP或siRNA敲除PKC-θ，能消除黄素诱导抑制IBa的作用;新型PKCdelta(PKC-δ)、epsilon(PKC-ε)和theta(PKC-θ)，但不包括eta(PKC-η)在神经元中内源性表达。 结论:姜黄素在大鼠海马神经元中通过新型的PKC-θ依赖途径抑制IBa，这个结论可能有利于证明姜黄素的神经保护作用。
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