论文部分内容阅读
癌症在全球范围内是最主要的致病及致死因素。由于抗癌药物自身的细胞毒性以及临床应用中不断产生的耐药性使得癌症的治疗依然面临巨大挑战，寻找新型、高选择性的抗癌药物是当今亟待解决的医药难题。天然产物及其衍生物一直被视为抗肿瘤药物筛选的主要来源，如长春新碱、阿霉素和丝裂霉素等。在众多的抗肿瘤药物筛选资源中，微生物因其具有丰富的次级代谢产物和便于规模化生产更适合作为研究材料。 本论文对青藏高原采集的Stereum hirsutum、澳大利亚北领地自治区所获Bipolarisluttrellii和福建山茶树分离所得Pestalotiopsis neglecta的次级代谢产物进行了深入的化学研究。利用现代色谱分离技术获得41个化合物，其中29个为新化合物（包括4个新骨架化合物）。通过质谱、核磁共振、圆二色谱、电子圆二色光谱、X-ray单晶衍射技术等波谱方法确定化合物的平面结构以及相对、绝对立体构型。 从S.hirsutum大米培养物分离得到25个化合物，包括多毛烷型倍半萜与α或β-石竹烯通过Diels Alder反应形成的新骨架化合物(1-4)，13个新的多毛烷型倍半萜衍生物(5-17)，5个新的缩酚酸衍生物(18-22)以及3个已知化合物(23-25);自B.luttrelliiPDB培养物获得新化合物cochlioquinone F(26)，cochlioquinones类已知化合物(27-29)及蛇孢菌素类已知化合物（30和31）;从P.neglecta大米发酵物分离得到10个ambuic acid衍生物(32-41)，其中6个为新化合物(32-37)。 对所得单体化合物应用抗肿瘤、细胞凋亡、降糖、抗疟原虫和抗炎等指标进行考察。多毛烷型倍半萜5、6、8和9能够显著抑制K562生长，而对小鼠胚胎成纤维细胞MEF的抑制作用相对较弱;多毛烷型倍半萜二聚体12-15对K562和HCT116均具有显著的细胞毒活性;多毛烷型倍半萜三聚体16和17则分别对HCT116和K562表现出选择细胞毒活性;缩酚酸衍生物18-22及24呈现出显著强于阿卡波糖的α-葡萄糖苷酶抑制活性;另外，anhydrocochlioquinone A(27)可诱导人结肠癌HCT116细胞AnnexinⅤ-PI双染阳性和caspase半胱氨酸酶激活，PARP蛋白切割，细胞色素c释放，以及Bcl-2蛋白表达下降;化合物27、28和30则具有较为显著的抗疟活性;化合物39和40具有强于氢化可的松的抗炎活性，ambuic acid(40)可明显抑制LPS诱导的iNOS蛋白表达升高。 研究结果表明上述三种真菌中存在结构种类丰富和活性多样的次级代谢产物，尤其是对肿瘤细胞株具有选择细胞毒活性和诱导肿瘤细胞凋亡的化合物值得深入发掘研究，为抗肿瘤药物筛选提供具药用潜力的先导化合物。