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1，本文应用原核表达载体pKK223-3构建了TNF cDNA的表达质粒pHT-2，并在E．coli JM105中高效表达。L-929细胞杀伤实验证实，每升培养物中的活性可达5-8X108u。经MonoQ，HohOP柱的联合FPLC层析纯化，每升可得到108 u的纯rTNF。SDS-PAGE分析显示一条带。80μg rTNF的内毒素实验结果为阴性，50μg rTNF在兔上的热源反应实验正常，该纯品可以用于临床治疗研究。 2，本文还应用基因融合栽体pRIT5构建了TNF cDNA融合基因表达质粒pAFT-1，并在E．coli HB101中得以表达。根据粗提物SDS-PAGE的扫描结果，表达产物占细菌蛋白的30％左右。该融合蛋白是蛋白A的IgG结合区ProA’同TNF的融合蛋白。由于ProA’同IgG结合的特性，经IgG SephaPose GFF亲和层析纯化得到了融合蛋白的纯品。该融合蛋白的分子量约50kD，L-929细胞杀伤实验表明，它的比活为4X107u／mg蛋白。由于ProA’的作用，经IgG介导，可以和表面有Fc受体的淋巴细胞结合，从而对一些淋巴细胞来源的肿瘤细胞具有一定的定向性，可能是一种潜在的抗淋巴细胞白血病的生物制剂。 3，为了得到有意义的TNF cDNA突交体，作者在四种脱氧核糖核酸比例不平衡的条件下进行了TNF cDNA的PCR扩增，提高了PCR产物的突交率。PCR产物直接重组到表达载体pKK223-3中，转化JM105，在含有诱导物IPTG的LB固体培养基平板上表达，逐个克隆进行L-929细胞杀伤活性的测定，得到一个比活性高的突变体，在JM105中表达活性高达1011u／L培养物，比pHT-2／JM105高80-100倍。DNA序列测定结果表明，在编码区有一个点突交。将对该突变体进行深入的研究。