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本研究的目的是构建嗜碱芽孢杆菌Bacillussp.N16-5的表达系统。在构建表达系统的过程中我们首先尝试利用表达载体pHCMC04直接在Bacillussp.N16-5对外源基因gfp进行表达，结果用荧光显微镜检测，观察不到荧光，推测pHCMC04所带的启动子无法在N16-5中使用或者由于启动子不强，核糖体结合位点效率太低导致荧光蛋白表达量太低，为此我们对N16-5不同碳源条件，pH下的转录组数据进行排序，找到5个在各种条件下转录水平都较高的基因，通过基因组序列对其ORF上游序列进行分析，推定其可能的启动子，利用启动子预测软件softberry-BPROM对这5个可能的启动子进行预测，进一步证实其符合启动子的特征;另外我们还对其可能的核糖体结合位点区进行了预测和比较，发现它们都带有AGGAGG的序列;以质粒pHCMC04为基础，删除了木糖诱导的启动子和木糖阻遏蛋白基因，插入带有多克隆位点和芽孢杆菌典型SD序列(AGGAGG)的报告基因gfp,构建了启动子探测载体pABN165pvT,对这5个可能的启动子及枯草芽孢杆菌组成型强启动子P43进行了鉴定，找到了2个能在N16-5中使用的启动子PEF和P43.以质粒pHCMC04为基础，利用筛到的启动子，SD序列(AGGAGG)和设计好的多克隆位点，构建表达载体。将报告基因gfp连入表达载体构建重组载体，转化Bacillussp.N16-5构建表达系统，利用荧光显微镜检测表达系统的构建情况，并利用多功能荧光读板仪对表达强度进行了定量检测，证明Bacillussp.N16-5表达系统构建成功。