【摘 要】
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本研究使用一种双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA,将重金属Cr分别与两种载体蛋白BSA和OVA连接起来,制备出具有免疫原性的重金属Cr的完全抗原Cr-DTPA-BSA和Cr-DTPA-OVA。在此基础上
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本研究使用一种双功能螯合剂p-SCN-Bn-DTPA,将重金属Cr分别与两种载体蛋白BSA和OVA连接起来,制备出具有免疫原性的重金属Cr的完全抗原Cr-DTPA-BSA和Cr-DTPA-OVA。在此基础上通过筛选纳米抗体库的方式成功获得了可以检测出抗Cr-DTPA的噬菌体抗体Cr-DTPA-VHH4-63,测定出其亲和常数为1.279×109 L/mol。该抗体与不含重金属离子的抗原以及载体蛋白之间不发生结合,其他金属离子也不会对其检测产生干扰。围绕已经获得的纳米抗体,我们建立可以检测重金属铬的间接竞争性ELISA检测法。该方法最低检出限为6.6μg/L,IC50为75 mg/L,加标回收实验回收率处于90%～114%之间,稳定性好。以上结果表明该检测法已经达到国家饮用水的检测标准,可用于农业灌溉用水及生活饮用水中的重金属检测。本课题将抗体库筛选技术与重金属检测成功联系起来,为今后进一步对重金属免疫检测以及其他免疫检测的研究提供了新的思路。
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