草鱼Noxa基因的克隆及其对GCRV入侵应答的转录机制分析

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本研究克隆了草鱼Noxa基因全长cDNA,序列分析表明其与斑马鱼Noxa基因同源,利用荧光定量PCR(qPCR)的方法研究其在GCRV刺激下的表达模式,草鱼noxa在GCRV攻毒后的中肾、脾脏和头肾中表达发生显著性变化,攻毒后24 h和120 h出现显著上调表达。对草鱼noxa启动子活性分析表明,基因上游-678/-452 bp区段为启动子转录活性所必须,对启动子应答GCRV入侵的转录活性研究表明草鱼noxa上游-678/-603 bp区段为GCRV诱导转录激活敏感区段,对该区段位点缺失启动子活性分析发现CEBPβ/ATF4结合位点缺失使GCRV诱导下的启动子活性下降55%。通过蛋白质谱鉴定GCRV诱导下草鱼noxa启动子结合蛋白,基于数据库蛋白网络构建和启动子基序模式匹配的方法研究GCRV诱导草鱼noxa表达调控机制表明SMAD信号通路和TNF信号通路可能参与noxa基因的表达调控。
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