高产金针菇菌丝发酵、多糖提取的工艺优化及诱变选育

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金针菇菌丝体相对于金针菇子实体,不管是在药用效果,还是在生物活性物质方面,前者都明显优于后者,而金针菇多糖又是其药用效果和生物活性的主要成分之一。本文主要从金针菇发酵条件的优化,菌丝体多糖的提取工艺优化和金针菇菌株的诱变来选育高产菌丝体多糖菌株,期望为国内金针菇菌丝体多糖类药用品和保健品的开发作出贡献。
  金针菇高产菌丝体菌株的初筛及发酵工艺条件优化的试验中,首先从四株备选金针菇菌株中筛选出了3号金针菇,该金针菇在25℃的液体培养基中具有产菌丝体能力强的特点。紧接着,对3号菌株的发酵条件进行单因素试验以及正交试验,最终以菌丝干重为判定标准,对3号金针菇的生长条件进行了四因素三水平的正交优化,根据正交试验极差得出各因素的影响大小为:培养时间>接种量>可溶性淀粉用量>麦麸用量,发酵工艺的最佳条件为培养时间16d、接种量4×169mm2、可溶性淀粉用量16g、麦麸用量120g,在此最佳发酵条件下,得到的菌丝干重为5.12g。
  在金针菇菌丝体多糖提取及提取工艺优化的试验中,以多糖提取率为评判标准,在单因素试验的基础上,对金针菇菌丝体多糖的提取进行三因素三水平的正交试验优化,得出的各因素影响力大小依次为:提取时间>料液比>提取温度。最终得出金针菇菌丝体多糖提取工艺的最佳条件为料液比50:1、提取时间2.5h、提取温度80℃,在此工艺条件下,进行验证试验,结果在该条件下得到的金针菇菌丝体多糖提取率为3.93%,低于正交试验最优组合试验9的提取率,但考虑到节约能源与时间,最终还是选择最佳条件,即料液比50:1、提取时间2.5h、提取温度80℃为正交试验的最佳组合。
  金针菇诱变处理试验中,以选育出高产金针菇菌丝体多糖的菌株为目标,对3号金针菇菌株进行了紫外诱变处理和甲基磺酸乙酯诱变处理,并通过对突变株的筛选,以及遗传稳定性考察,最终选定遗传性状稳定,高产金针菇菌丝体多糖E1菌株。
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