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本课题借助南京诺唯赞医疗科技有限公司的实验室提供的原材料和平台条件，研发了一种新型定量检测重金属镉含量的检测试剂。该技术用量子点代替传统的示踪物质，作为示踪物质，量子点具有不淬灭，稳定性优良，灵敏度高的优点。
本文阐述CdSe/CdS/ZnS量子点的制备以及后续研发过程中质控线和检测线包被浓度以及量子点稀释比例的调试，同时对量子点稀释液以及样品垫处理液中蛋白或者蔗糖添加量进行调试，并对试剂的灵敏度、特异性、精密性及稳定性能进行评价。主要研究结果如下:
1制备的CdSe/CdS/ZnS核壳型油性量子点，最大荧光波长在605nm。
2制备金属镉单克隆抗体，获得单克隆细胞株6C3、8E8，效价分别为1.28×105、1.024×106。
3检测试剂盒工艺优化以及性能评估
质控线的包被浓度梯度设为0.5mg/mL、0.75mg/mL、1mg/mL，检测线的包被浓度为0.5mg/mL、1mg/mL、1.5mg/mL，交叉反应，最终确定质控线最佳包被浓度为0.75mg/mL，检测线的最佳包被浓度为1mg/mL。
按照最佳包被浓度包被检测线和质控线，量子点和稀释液的稀释比例为1∶1、1∶4、1∶9(体积比)，对照实验除量子点稀释比例不同，其他组分完全相同，比较不同量子点条件下线性范围及测量值的差异，最终确定稀释比例为1∶4。
在基础量子点稀释液里面添加不同量的蔗糖:0、2％、5％、10％，按照最佳稀释比例处理量子点，对照实验除标记物垫不同，其他组分完全相同，比较不同标记物条件下线性范围及测量值的差异，最终确定标记物稀释液中蔗糖最适添加量为5％。
在量子点稀释液中添加不同浓度的BSA:0、0.1％、0.5％、2％，按照最佳包被浓度包被检测线和质控线，对照实验除标记物不同，其他组分完全相同，比较不同标记物垫条件下检测金属离子-EDTA混合液，比较线性范围和测量值差异，最终确定量子点稀释液中BSA的最适添加量为0.5％。
在样品垫处理液0.1mol/LHEPES8.0中添加不同浓度的Casein和蔗糖，按照最佳包被浓度包被检测线和质控线，对照实验除样品垫不同，其他组分完全相同，比较不同样品垫条件下检测标准品稀释液时的背景信号值，最终确定样品垫处理液中Casein和蔗糖的最优添加量分别为0.5％和5％。
试剂盒灵敏度达1.25ng/mL，线性范围为1.25-500ng/mL;检测不同浓度金属离子与EDTA的螯合物，当浓度小于2000ng/mL时，试剂与Cu2+、Mn2+、Hg2+、Zn2+、Fe3+、Pb2+、Cr3+均无交叉反应;检测2.5、100ng/mLCd2+-EDTA标准品各10次，计算CV值，结果均小于10％;将试剂卡放在37℃考核加速稳定性20天，与4℃对照相比，高值和低值检测结果变幅小于15％，重复性变异系数小于15％;大米中添加Cd2+回收率为96.1％，在85％-115％之间，试剂盒检测结果可靠。
本文阐述CdSe/CdS/ZnS量子点的制备以及后续研发过程中质控线和检测线包被浓度以及量子点稀释比例的调试，同时对量子点稀释液以及样品垫处理液中蛋白或者蔗糖添加量进行调试，并对试剂的灵敏度、特异性、精密性及稳定性能进行评价。主要研究结果如下:
1制备的CdSe/CdS/ZnS核壳型油性量子点，最大荧光波长在605nm。
2制备金属镉单克隆抗体，获得单克隆细胞株6C3、8E8，效价分别为1.28×105、1.024×106。
3检测试剂盒工艺优化以及性能评估
质控线的包被浓度梯度设为0.5mg/mL、0.75mg/mL、1mg/mL，检测线的包被浓度为0.5mg/mL、1mg/mL、1.5mg/mL，交叉反应，最终确定质控线最佳包被浓度为0.75mg/mL，检测线的最佳包被浓度为1mg/mL。
按照最佳包被浓度包被检测线和质控线，量子点和稀释液的稀释比例为1∶1、1∶4、1∶9(体积比)，对照实验除量子点稀释比例不同，其他组分完全相同，比较不同量子点条件下线性范围及测量值的差异，最终确定稀释比例为1∶4。
在基础量子点稀释液里面添加不同量的蔗糖:0、2％、5％、10％，按照最佳稀释比例处理量子点，对照实验除标记物垫不同，其他组分完全相同，比较不同标记物条件下线性范围及测量值的差异，最终确定标记物稀释液中蔗糖最适添加量为5％。
在量子点稀释液中添加不同浓度的BSA:0、0.1％、0.5％、2％，按照最佳包被浓度包被检测线和质控线，对照实验除标记物不同，其他组分完全相同，比较不同标记物垫条件下检测金属离子-EDTA混合液，比较线性范围和测量值差异，最终确定量子点稀释液中BSA的最适添加量为0.5％。
在样品垫处理液0.1mol/LHEPES8.0中添加不同浓度的Casein和蔗糖，按照最佳包被浓度包被检测线和质控线，对照实验除样品垫不同，其他组分完全相同，比较不同样品垫条件下检测标准品稀释液时的背景信号值，最终确定样品垫处理液中Casein和蔗糖的最优添加量分别为0.5％和5％。
试剂盒灵敏度达1.25ng/mL，线性范围为1.25-500ng/mL;检测不同浓度金属离子与EDTA的螯合物，当浓度小于2000ng/mL时，试剂与Cu2+、Mn2+、Hg2+、Zn2+、Fe3+、Pb2+、Cr3+均无交叉反应;检测2.5、100ng/mLCd2+-EDTA标准品各10次，计算CV值，结果均小于10％;将试剂卡放在37℃考核加速稳定性20天，与4℃对照相比，高值和低值检测结果变幅小于15％，重复性变异系数小于15％;大米中添加Cd2+回收率为96.1％，在85％-115％之间，试剂盒检测结果可靠。