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目的： 多发性骨髓瘤（MM，Multiple Myeloma）是一种以骨髓中单克隆浆细胞大量增生为特征的恶性血液病，近年来蛋白酶体抑制剂作为一线药物在多发性骨髓瘤的治疗上取得良效，但其产生的耐药问题仍然引起我们的重视，我们实验室前期研究发现和证实了OTX015的抗骨髓瘤作用，本实验探索了OTX015联合蛋白酶体抑制剂对骨髓瘤细胞的作用及其可能存在的机制，为临床寻找治疗耐蛋白酶体抑制剂的多发性骨髓瘤提供新的策略及其理论依据。 方法： 1.CCK-8法检测OTX015联合蛋白酶体抑制剂（硼替佐米、卡非佐米及伊莎佐米）对骨髓瘤细胞（RPMI8226）增殖抑制的联合指数。 2.骨髓瘤细胞（RPMI8226）分为对照组、OTX015单药组、蛋白酶体抑制剂单药组及OTX015联合蛋白酶体抑制剂组，荧光定量PCR（Q-PCR）检测c-myc、PSMB5、PSMB7在各组中的相对表达量，蛋白质免疫印迹（WB，western blot）检测各组c-myc蛋白及蛋白酶体β2及β5亚基的表达，蛋白酶体活性检测试剂盒检测各组细胞蛋白酶体糜蛋白酶样活性。 3.染色质免疫沉淀（CHIP）探索c-myc蛋白与PSMB5及PSMB7基因之间的联系。 结果： 1.OTX015与蛋白酶体抑制剂在一定药物浓度范围内对骨髓瘤细胞的增殖抑制存在协同作用（联合指数CI<1）。 2.荧光定量PCR显示OTX015联合蛋白酶体抑制剂组较蛋白酶体抑制剂单药组骨髓瘤细胞c-myc、PSMB5及PSMB7相对表达水平显著下降（p<0.05）；western blot显示骨髓瘤细胞c-myc蛋白的表达在OTX015联合蛋白酶体抑制剂组较蛋白酶体抑制剂单药组明显下降，蛋白酶体亚基β2及β5的表达也有一定程度的下降；蛋白酶体活性检测显示骨髓瘤细胞糜蛋白酶样活性在OTX015联合蛋白酶体抑制剂组较单用蛋白酶体抑制剂组均有显著下降（p<0.05）。 3.染色质免疫沉淀证实骨髓瘤细胞中c-myc蛋白与PSMB5和PSMB7基因启动子区结合。 结论： OTX015与蛋白酶体抑制剂存在体外协同抗骨髓瘤作用，其机制可能为OTX015抑制c-myc蛋白的表达，从而下调蛋白酶体亚基基因的转录，抑制了蛋白酶体的产生，通过与蛋白酶体抑制剂不同的途径抑制泛素-蛋白酶体系统发挥抗骨髓瘤作用。因此，OTX015有望用于多发性骨髓瘤，尤其是耐蛋白酶体抑制剂的多发性骨髓瘤的治疗。