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本论文为三年攻读硕士学位期间的研究工作,共由三部分组成。第一部分综述了微生物次级代谢产物中环肽类化合物的研究概况(第一章);第二部分阐述了放线菌次级代谢产物的化学筛选(第二章);第三部分详述了三株放线菌次级代谢产物化学成分的研究(第三、四、五章)。
第一部分、微生物次级代谢产物中环肽的研究进展
环肽是指一类主要由常见氨基酸和一些不常见氨基酸以肽键形成的环状化化合物。环肽类化合物由于其具有抗肿瘤、抗菌、抗真菌等生物活性,已成为20世纪乃至是21世纪科学研究的一个热门领域。本文在查阅文献的基础上,主要对2005-2009年微生物代谢产物中发现的环肽就来源和生物活性进行了综述。
第二部分、放线菌次生代谢产物的化学筛选
化学筛选法已被用来评价微生物的发酵产物。在活性筛选的基础上,对活性较好的6株菌在八种不同的发酵培养基中进行培养发酵,通过对其发酵物进行TLC及HPLC检测分析,确定了各株菌的最佳发酵培养基。EA培养基作为YIM63342菌株的发酵培养基;HKI培养基作为菌株YIM56130的发酵培养基;SF培养基做为菌株YIM65408的发酵培养基;61#培养基作为菌株YIM61470的发酵培养基;GL培养基作为菌株YIM61297的发酵培养基;HKI培养基作为菌株YIM48924的发酵培养基。
第三部分、三株放线菌次级代谢产物化学成分的研究
微生物次级代谢产物多样,很多具有药物活性,已成为天然产物研究开发的一个重要资源。而在微生物中,放线菌是微生物代谢产物研究最重要的类群,它们存在于不同自然生态环境中,可以产生多种不同的天然产物。
我们对三株放线菌发酵液的化学成分进行了研究,运用硅胶柱层析、凝胶柱层析等方法进行分离纯化。从其发酵液提取物中共分离得到32个化合物,经IR,ESI-MS,NMR等光谱数据鉴定及与文献对照,确定了27个化合物,其中有7个在不同的放线菌中重复分离得到。化合物类型包括环二肽、核苷、糖苷、多元醇、异黄酮、甾体、脂类等。其中有6个化合物为新的天然产物,其他化合物均首次从该属放线菌发酵液中分离得到。
从菌株YIM48782的发酵液中分离得到了10个化合物,鉴定了其中的8个化合物,分别为O6-乙基-β-D-呋喃果糖苷(1)、环(脯-天冬酰胺)(2)、环(脯-丝)(3)、环(脯-丙)(4)、环(脯-苏)(5)、尿嘧啶(6)、对羟基苯甲醛(7)、β-胡萝卜甙(8)。化合物1、2首次从天然物中分离得到,化合物3~8均首次从该放线菌的发酵物中分离得到。
从菌株YIM48789的发酵液中分离得到了9个化合物,根据光谱数据鉴定为:1-0-乙酰基-D-甘露醇(1)、环(脯-丝)(2)、尿嘧啶核苷(3)、2’-脱氧尿嘧啶核苷(4)、腺嘌呤核苷(5)、甘露醇(6)、4’,7-二羟基异黄酮(7)、2,3-丁二醇(8)、β-胡萝卜甙(9)。化合物1首次从天然物中分离得到,化合物2~9均首次从该放线菌的发酵物中分离得到。
从菌株YIM30006的发酵液中分离得到了13个化合物,鉴定了其中的10个化合物:环二(δ-N-乙酰基-L-鸟氨酸)肽(1)、环(脯-丝)(2)、环(脯-苏)(3)、己二酸二甲酯(4)、O6-n-丁基-D-甘露糖苷(5)、尿嘧啶(6)、尿嘧啶核苷(7)、4’,5,7-三羟基异黄酮(8)、尿素(9)、D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-D-吡喃葡萄糖基(4→1)-D-吡喃葡萄糖苷(10)。其中化合物1、4和5为新的天然产物,其余化合物均首次从该放线菌的发酵物中分离得到。