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鸡传染性支气管炎(Infectious Bronchitis，IB)是由传染性支气管炎病毒(InfectiousBronchitis Virus，IBV)引起的在世界范围内影响养禽业发展的急性、高度接触性传染病。IBV血清型众多且易发生变异，给IB的防控带来很大的困难。为了解近年来华南地区。IBV血清型流行情况，探究IBV的血清型与基因型的相关性，本研究以国际经典毒株和疫苗毒株作为标准毒株并应用这些毒株制备兔血清抗体，通过鸡胚气管环(ex vivo Tracheal organ cultures，TOC)交叉中和试验，对2007年～2010年分离自华南地区的27株IBV进行血清学分型，结合这些毒株的S1基因序列，分析IBV血清型与基因型的相关性。在此基础上，根据毒株的血清型与基因型筛选出代表毒株做生物学特性研究。 选择5株IBV标准毒株，分别为M41株、T株、Holte株、Ark株和D41株，参照GenBank中已发表的这些毒株的S1基因序列，设计了1对S1基因特异引物，采用RT-PCR方法成功地扩增出了5株标准毒株的S1基因，并通过克隆、序列测定获得了它们的S1全基因核苷酸序列。将测定的S1基因序列与GenBank中收录的相应毒株的S1基因序列做比对，结果显示M41株、T株和D41株与GenBank中收录的相应毒株的S1基因序列相似性为100％，Holte株与GenBank中收录的相应毒株的S1基因序列相似性为990％，Ark株与GenBank中收录的相应毒株的S1基因序列相似性为99.8％。 为满足中和试验的需要，制备IBV标准毒株的兔血清抗体。将纯化后的各标准毒株用无特定病原体(Specific-pathogen-free，SPF)鸡胚连续传3代，并收集第3代毒株尿囊液，经低速和超速离心法离心尿囊液浓缩病毒。先后用弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂乳化病毒浓缩液，皮下分点注射免疫新西兰大白兔，免疫4次。利用琼脂扩散试验检测抗体滴度，四免后各毒株兔血清抗体滴度如下：M41株为1:32，Holte株为1:64，Ark株为1:32，T株为1:64，D41株为1:64。各标准毒株的兔血清抗体均能够满足中和试验抗原抗体反应的要求。 TOC是IBV增殖的适宜组织，对TOC系统的监测是IBV血清分型的有效方法。利用18～20日龄的SPF鸡胚制备TOC，并用含有2％胎牛血清的M199营养液培养。采用等倍比稀释病毒的方法接种TOC来测定标准毒株和分离株TOC-ID50，以TOC纤毛停止摆动和上皮细胞脱落作为感染指标，观察并记录TOC病变。以同样的方法平行测定4次，按照Reed-Muench法计算各毒株的TOC-ID50，取其算术平均值。5株标准毒株和27株分离株的TOC-ID50算术平均值在10-6.7～10-5.2(/0.5 mL)之间，且主要集中在10-6.0(/0.5 mL)左右。TOC-ID50的测定为下一步恒量病毒提供可靠的依据。 为了探究各IBV分离株的血清型，采用固定病毒稀释血清的方法通过血清与病毒的中和反应对IBV进行血清亲缘关系测定。5株标准毒株中，M41株与D41株血清亲缘关系较近。27株分离株中，属于Mass型的有9株，属于T型的有5株，属于Holte型的有3株，属于D41型的有2株，属于Ark型的有1株，其余7株IBV不属于这5种标准血清型。试验结果初步了解了近年来华南地区IBV血清型的流行情况，对临床防治IB具有指导意义。 为了解IBV血清型和基因型之间的相关性以及不同血清型毒株在生物学特性方面是否存在差异，将27株IBV分离株的血清型与基因型进行比较。结果显示只有3株毒株的血清型和基因型同属于Mass型，其他IBV分离株的血清型和基因型无明确的对应关系，检测结果表明IBV的血清型和基因型之间存在较低的相关性。从27株IBV分离株中选择7株具有代表性的毒株做新城疫病毒(Newcastle Disease Virus，NDV)La Sota株干扰试验、鸡胚矮小化试验、鸡红细胞血凝抑制试验等生物学特性试验。7株代表毒株均能干扰NDV La Sota株在鸡胚中的增殖，均能产生致鸡胚矮小化作用，用胰酶处理的IBV代表株对鸡红细胞的血凝价为1:25～1:27，但不同血清型毒株的生物学特性没有呈现明显差异。