牛奶中替米考星残留的HPLC检测方法的研究

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替米考星(Tilmicosin)是美国礼来公司(Lilly)于上个世纪80年代开发的半合成大环内酯类畜禽专用抗生素.替米考星由于其特殊的抗菌活性和药动学特征,先后在澳大利亚、巴西、法国、马来西亚、意大利、西班牙、美国等国家被批准上市,饮水剂的商品名为Pulmotil,注射剂的商品名为Micotil,临床用于牛、山羊、绵羊、奶牛、猪、鸡等动物由敏感菌引起的感染性疾病,特别是畜禽呼吸道感染,如家畜放线杆菌性胸膜肺炎,巴氏杆菌病,鸡霉形病以及泌乳动物乳房炎的防治. 替米考星不管是内服还是皮下注射给药,吸收极为迅速,达峰时间快,组织穿透力强,体内分布容积大,在乳中药物浓度高,维持时间长,半衰期达1~2天,这些特殊的药代动”力学特征尤其适合于家畜乳房炎的治疗. 目前牛奶中抗生素残留问题日益受到国际社会的重视。美国早在多年前就已经对牛奶中抗生素的残留进行监测,并规定超过允许量标准的牛乳及其乳制品全部废弃处理,不得食用。欧美国家多年前即明文禁止抗生素残留超量的牛奶上市. 我国针对牛奶的安全问题,制定了一系列的法律法规,我国在发布的《乳与乳制品卫生管理办法》中明文规定,因使用抗生素治疗牛乳房炎的牛所产鲜奶,5天内不得作为食品销售。我国过去对牛奶中抗生素残留卫生指标无明文规定,直到2001年10月,农业部发布实施了《无公害食品生鲜牛乳行业标准》,对新鲜牛乳的卫生指标明确了“抗生素不得检出”。但我国目前并未能严格执行这些规定,致使我国牛奶及奶制品中抗生素残留问题一直未能得到解决,以至引起了人们对牛奶安全问题的担忧,并成为越来越受关注的热点。 欧盟等国家都对替米考星的最大残留限量做了相应的规定。欧盟规定替米考星在牛、猪、羊、鸡组织中的最大残留限量为50μg/kg~1000μg/kg,在牛奶中的最大残留限量为50μg/kg;我国也制订了替米考星在动物组织中的最大残留限量为75μg/kg~1500μg/kg,但我国尚未制订牛奶中替米考星的最大残留限量。 因此,为了保证人们饮用牛奶的卫生和安全,有必要对牛奶中替米考星的残留进行监控,建立起相应的检测方法。 目前国内外对替米考星在动物组织中残留的检测方法报道较多。多为高效液相色谱法紫外检测器方法。 本研究建立了牛奶中替米考星残留的高效液相色谱法紫外检测方法。样品用乙腈提取后,C18柱净化,在290nm下HPLC测定。该方法在空白牛奶中添加25、50、100μg/L浓度的水平下,其平均回收率在72.1%~85.8%之间,日内变异系数在7.0%~10.7%之间,日间变异系数在3.5%~5.4%之间,检测限为5μg/L。研究结果表明该方法可适用于牛奶中替米考星残留的测定。
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