Nampt介导的细胞抗凋亡机制研究

• 作 者: 周荣华
• 机 构: 华中农业大学
• 出 处: 华中农业大学
• 发表日期: 2014年期
• 关键词: 消耗酶 线粒体数量 抗凋亡机制 细胞死亡 Nampt介导

细胞死亡是细胞正常生命周期的一部分，包括细胞坏死和细胞凋亡。细胞凋亡是一直以来都与癌症的发生与治疗存在密切的关系，也是生命科学中的一大焦点问题，研究细胞的凋亡与抗凋亡机制对疾病的预防与治疗具有非常重要的意义。烟酰胺磷酸核糖转移酶（Nicotinamide phosphoribosyltransferase，Nampt)，又称内脏脂肪素(Visfatin)，或前B细胞克隆增强因子（PBEF）。由于Nampt与细胞抗衰老、抗凋亡相关而倍受关注。尽管Nampt的细胞抗凋亡作用已被广泛研究，尤其是与促进 NAD+的合成相关的抗凋亡机制，但其抗凋亡的调控机制及信号途径等尚未得到清楚的解释。　　本研究用H2O2处理细胞以建立细胞凋亡模型，通过qPCR、western blot、细胞AnnexinV—FITC/PI细胞凋亡双染色法、基因敲减等技术系统地探究了Nampt促进细胞抗凋亡作用的分子及信号机制，获得如下研究结果(在氧化应激条件下获得)：　　1.氧化应激上调CD38和PARP1的表达，而过表达Nampt可抵消氧化应激对CD38和PARP1的上调作用；　　2. Nampt可下调p53的表达，过表达p53可消除Nampt对CD38的下调作用；　　3.Nampt可减弱氧化应激对细胞线粒体数量及线粒体膜电位的损伤；　　4. Nampt可上调Nrf2的表达；　　5.过表达 Nrf2同样可维护线粒体数量与膜电位，而敲减 Nrf2则减弱过表达Nampt对线粒体数量及膜电位的维护作用；　　6.过表达 Nampt或 Nrf2可上调线粒体数量和功能相关基因 AMPKα和 PPARα的表达，敲减Nampt或Nrf2则均能下调AMPKα和PPARα的表达；敲减AMPKα或PPARα也可阻止Nampt对线粒体数量与膜电位的维持作用。　　上述结果表明，在H2O2刺激条件下，Nampt可通过Sirtins-p53通路下调NAD+消耗酶CD38和PARP1表达；还可以维持氧化应激引起的细胞线粒体数量与膜电位的改变，而且这种作用是通过Nrf2-AMPKα/PPARα信号途径实现的。