【摘 要】
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该论文以该实验室保存的深海适冷交替假单孢菌Pseudoaltermonas sp. SM9913所产的适冷蛋白酶为研究对象,着眼于解决产酶效率和酶的稳定性两方面制约适冷蛋白酶产业化应用的关
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该论文以该实验室保存的深海适冷交替假单孢菌Pseudoaltermonas sp. SM9913所产的适冷蛋白酶为研究对象,着眼于解决产酶效率和酶的稳定性两方面制约适冷蛋白酶产业化应用的关键因素,取得了一定的进展.比较了几种不同的糖(葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、海藻糖)对粗酶液稳定性的保护作用,海藻糖的保护作用最为显著.进一步研究了海藻糖在不同温度条件--20℃、30℃、40℃下以及不同浓度的海藻糖对粗酶液的保护情况,结果表明,不同温度(20~40℃)下,海藻糖对粗酶液热稳定性都有良好的保护作用,在一定程度上有效地阻止了适冷酶蛋白的自溶,而且温度越高,这种保护作用就越显著.海藻糖对粗酶液热稳定性保护作用的最佳浓度为10~15﹪.海藻糖用于适冷蛋白酶纯酶的稳定性保护同样取得了很好的效果,加入海藻糖后的纯酶溶液40℃保温30min,酶活基本没有丧失.根据HPCE检测数据,结合国外近年来的实验数据、研究结果,对海藻糖稳定酶蛋白活性的机制进行了分析,推测海藻糖对酶分子的稳定性保护作用是通过对酶蛋白整体结构的结合而实现的.这种结合作用的驱动力来自于酶蛋白表面的亲水性以及海藻糖强的水合特性,海藻糖与酶蛋白之间似乎不存在强的氢键作用.
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