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目的:观察温和灸天枢穴（双）、上巨虚穴（双）对内脏痛敏IBS大鼠脊髓PKCε、NR1和NR2B表达的影响，从对PKCε、NR1和NR2B调节的角度阐释艾灸治疗内脏痛敏IBS的作用机制。 方法:采用目前国际公认的乳鼠结直肠球囊扩张刺激(CRD)的方法制备内脏痛敏IBS大鼠模型。通过腹壁撤回反射评分（AWR评分）、组织病理学观察（结肠HE染色）鉴定动物模型，造模成功后随机分为:正常组、模型组、温和灸组和NMDA受体阻断剂组。温和灸组选取大鼠天枢穴（双）、上巨虚穴（双）进行治疗，NMDA受体阻断剂组采用鞘内注射Ro25-6981治疗。治疗结束后观察比较各组大鼠AWR评分情况，并采用免疫组化方法检测大鼠脊髓PKCε、NR1和NR2B分布表达;采用免疫印迹法(western blot)检测大鼠脊髓PKCε、NR1和NR2B蛋白表达;采用Real-time PCR检测大鼠脊髓PKCε、NR1和NR2B mRNA表达。 结果: 第一部分:1）成功制备内脏痛敏IBS大鼠模型。2）治疗后模型组大鼠AWR评分明显增高，与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.001);温和灸组、NMDA受体阻断剂组大鼠AWR评分均明显降低，与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.001)。 第二部分:免疫组化检测结果显示，模型组大鼠脊髓背角PKCε、NR1和NR2B表达在laminaⅠ、Ⅱ层，且表达明显增高，与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.001);温和灸组、NMDA受体阻断剂组大鼠脊髓PKCε、NR1和NR2B表达在laminaⅠ、Ⅱ层，且表达明显降低，与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.001）。 第三部分:western blot检测结果显示，模型组大鼠脊髓PKCε、NR1和NR2B蛋白表达明显增高，与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.001);温和灸组、NMDA受体阻断剂组大鼠脊髓PKCε、NR1和NR2B蛋白表达明显降低，与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。 第四部分:荧光定量PCR检测结果显示，模型组大鼠脊髓PKCε、NR1和NR2BmRNA表达明显增高，与正常组比较差异有统计学意义（P＜0.001）;温和灸组、NMDA受体阻断剂组大鼠脊髓PKCε、NR1和NR2B mRNA表达明显降低，与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.001)。 结论: 1)艾灸可显著降低内脏痛敏IBS大鼠AWR评分，改善结直肠球囊扩张刺激引起的IBS大鼠内脏痛敏状态。 2)内脏痛敏IBS大鼠脊髓PKCε、NR1和NR2B表达异常增高，PKCε、NR1和NR2B可能在脊髓水平参与了IBS内脏痛敏的痛觉信号转导。 3)艾灸可显著下调内脏痛敏IBS大鼠脊髓水平PKCε、NR1和NR2B的表达，改善内脏痛敏状态。通过降低内脏痛敏IBS大鼠脊髓PKCε、NR1和NR2B表达，减弱内脏痛敏信号的转导，抑制中枢敏化的形成，可能是艾灸调节内脏痛敏状态的重要中枢机制之一。