【摘 要】
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目的：建立检测博尔纳病病毒(Borna disease virus，BDV)基因组和mRNA的原位杂交方法，分析接种病毒后不同时间点BDV基因在Wistar大鼠脑组织中的分布与表达情况。 方法：首先用地
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目的：建立检测博尔纳病病毒(Borna disease virus，BDV)基因组和mRNA的原位杂交方法，分析接种病毒后不同时间点BDV基因在Wistar大鼠脑组织中的分布与表达情况。
方法：首先用地高辛(Digoxin，DIG)RNA标记试剂盒分别制备检测BDV基因组和mRNA的DIG标记RNA探针，包括BDV p24和p40正义链探针、p24.和p40反义链探针，点滴实验(spot test)检测各探针的标记效率，点杂交法(dotblot hybridization)检测各探针的特异性，并用各探针对BDV接种Wistar大鼠脑组织连续石蜡切片进行原位杂交检测。
结果：各探针的标记效率和特异性均达到实验要求，经检测BDV基因组主要分布在中枢神经系统中靶细胞的细胞核内，p40 mRNA和p24 mRNA在中枢神经系统中靶细胞的细胞核和细胞浆中均有存在：BDV接种后三周，BDV基因组主要分布在皮质和海马等神经元的细胞核内，仅少量分布于丘脑和下丘脑；而BDV接种后六周和四个月，皮质和海马等神经元细胞核内的阳性信号仍持续存在，丘脑和下丘脑的阳性信号明显增加；mRNA的分布范围与基因组的分布范围基本一致，但在脑脉络丛细胞中仅见到有p24 mRNA的强阳性表达。BDV接种新生Wistar大鼠后三周鼠脑内病毒基因组和mRNA的表达水平相同，但在接种BDV后六周或四个月时鼠脑内病毒基因组和mRNA的表达水平不同。
结论：随着BDV感染时间的延长，病毒在动物脑组织中核酸的表达与分布形式多样，这可能是BDV感染动物出现多种类型症状的重要基础。
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