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第一部分
目的:通过检测白介素17(IL-17)在结肠癌癌组织、癌旁组织和正常组织中的表达,探讨IL-17与结肠癌之间的关系。
方法:收集46例结肠癌组织标本,分别取癌组织,癌旁组织,正常组织进行对比,并且分为左右半结肠癌两组进行对比,使用免疫组织化学方法检测IL-17表达水平。
结果:IL-17在癌组织,癌旁组织,正常组织三者之间表达差异具有统计学意义,其中癌组织中表达水平最高,癌旁组织次之,正常组织最低。而左右半结肠癌两组之间IL-17水平差异没有统计学意义。
结论:IL-17可能在结肠癌的发生发展过程中起到促进作用。
第二部分
目的:本实验通过研究细胞微环境中IL-17对细胞株是否有形态及增值影响,及其对细胞的上皮间质转化的相关性蛋白表达研究。
方法:购买RKO细胞株,将细胞培养至对数生长期。取对数生长期的细胞分别传代至6孔板,分别加入浓度为0(等量PBS)、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL重组人类IL-17。每个浓度设置2个复孔,培养0h、24h、48h后在400倍视野倒置显微镜下观察细胞形态学变化。根据细胞形态不同,找出形态变化最显著的培养孔,确定其对应的IL-17浓度,该浓度为最适实验浓度进行后续实验,在做QRT-PCR法研究其EMT相关蛋白表达情况。
结果:经过观察后在100ng/ml最高浓度的时候细胞变化形态最高,100ng/ml浓度IL-17与对照组相比E-钙黏蛋白明显下调,具有统计学意义(P<0.05);而N-钙黏蛋白则明显上升,具有统计学意义(P<0.05)。
结论:在单纯的IL-17微环境下,IL-17可以作用于结肠肿瘤细胞来实现EMT过程。
目的:通过检测白介素17(IL-17)在结肠癌癌组织、癌旁组织和正常组织中的表达,探讨IL-17与结肠癌之间的关系。
方法:收集46例结肠癌组织标本,分别取癌组织,癌旁组织,正常组织进行对比,并且分为左右半结肠癌两组进行对比,使用免疫组织化学方法检测IL-17表达水平。
结果:IL-17在癌组织,癌旁组织,正常组织三者之间表达差异具有统计学意义,其中癌组织中表达水平最高,癌旁组织次之,正常组织最低。而左右半结肠癌两组之间IL-17水平差异没有统计学意义。
结论:IL-17可能在结肠癌的发生发展过程中起到促进作用。
第二部分
目的:本实验通过研究细胞微环境中IL-17对细胞株是否有形态及增值影响,及其对细胞的上皮间质转化的相关性蛋白表达研究。
方法:购买RKO细胞株,将细胞培养至对数生长期。取对数生长期的细胞分别传代至6孔板,分别加入浓度为0(等量PBS)、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL重组人类IL-17。每个浓度设置2个复孔,培养0h、24h、48h后在400倍视野倒置显微镜下观察细胞形态学变化。根据细胞形态不同,找出形态变化最显著的培养孔,确定其对应的IL-17浓度,该浓度为最适实验浓度进行后续实验,在做QRT-PCR法研究其EMT相关蛋白表达情况。
结果:经过观察后在100ng/ml最高浓度的时候细胞变化形态最高,100ng/ml浓度IL-17与对照组相比E-钙黏蛋白明显下调,具有统计学意义(P<0.05);而N-钙黏蛋白则明显上升,具有统计学意义(P<0.05)。
结论:在单纯的IL-17微环境下,IL-17可以作用于结肠肿瘤细胞来实现EMT过程。