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钠氢离子交换泵1(NHE1)是一种跨膜蛋白，具有调节细胞内pH、影响细胞存活、生长和分化，作为已经被证明的J亚群白血病病毒受体在该病的进程中起着关键性的作用。钠氢离子交换泵在机体内具有重要的生物学作用，哺乳类动物和禽类的钠氢交换机制有很大不同，哺乳类动物的肾脏具有钠氢交换的重要功能，而禽类的大肠和小肠具有高效的钠离子吸收机制。迄今为止，一直没有鸡钠氢离子交换泵1在各个组织内表达和分布的数据。我们通过实时荧光定量PCR和免疫组化以确定三黄鸡NHE1的mRNA和蛋白的表达水平。在三黄鸡的各个组织中检测NHE1的mRNA表达。蛋白的表达在三黄鸡的各个组织表达差异性很大，而且与mRNA的表达相关性不大。确定三黄鸡mRNA和蛋白的表达模式有助于界定不同组织中NHE1的作用和它对生理和病理进程的贡献。为进一步阐明NHE1的功能及其在疾病发生、发展过程中的作用提供了基础数据。本研究共分为3部分内容： 1、三黄鸡NHE1基因的克隆及序列分析。以三黄鸡肝脏总RNA为模板，运用RT-PCR方法扩增了三黄鸡NHE1基因，并将其克隆到pMD18-T载体中进行测序，运用分子生物学软件对所获得的序列进行了分析。结果表明，所克隆的三黄鸡NHE1基因约2412个核苷酸，编码804个氨基酸残基的蛋白，推测其相对分子质量约80kDa。与已报道的原鸡、鹌鹑、家鼠、猪、牛、人相应序列作比较，发现其核苷酸序列和氨基酸序列具有较高的同源性。对三黄鸡NHE1基因及其编码的氨基酸序列进行分析，发现了5个突变位点。 2、三黄鸡NHE1基因的半定量实验和荧光定量试验。 以三黄鸡各个组织中总RNA为模板，运用RT-PCR方法扩增了三黄鸡NHE1基因和Beta-actin基因，并将其克隆到pMD18-T载体中进行测序。半定量和荧光定量的结果较一致，NHE1在所有检测的组织器官都有表达，在肝脏、脾脏、肺脏、大脑、小脑和法氏囊表达水平较高。 3、三黄鸡NHE1蛋白的免疫组织化学分析。 利用免疫组织化学技术对NHE1蛋白在三黄鸡各个组织的分布进行了研究，结果表明，NHE1蛋白在三黄鸡的检测组织内均有不同程度表达和分布。NHE1蛋白在心肌细胞膜上呈现中强阳性的弥漫性表达。肝细胞为典型阳性，肝窦内皮细胞为阴性。脾脏，阳性细胞主要分布在白髓和红髓之间的边缘区。肺脏呼吸性细支气管和肺泡管的单层上皮、肺泡I型上皮细胞呈现弥漫性中或弱阳性反应，但肺泡Ⅱ型上皮细胞为强阳性。肾脏几乎所有的肾小管上皮细胞呈现典型的弥漫性的强阳性反应。在大脑皮质，阳性细胞主要分布在小锥体细胞层和大椎体细胞层，在小椎体细胞、大椎体细胞及其它的多形性神经细胞的胞浆和树突或轴突呈现弥漫性的中强阳性。在小脑，髓质区内的有髓神经纤维和基质呈现中强阳性。在法氏囊小结的皮质区和髓质区均可以见到较密集分布的呈现强阳性的淋巴细胞。气管的黏膜上皮呈现的典型的阳性反应，其中上皮的纤毛柱状细胞和基细胞为强阳性细胞；气管的黏膜固有层，气管腺呈现强阳性反应。