银杏叶提取物对发育期戊四氮点燃癫痫大鼠认知功能及海马神经细胞凋亡的影响

来源 :徐州医学院 徐州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:b903630080
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目的:建立戊四氮(Pentylenetetrazol, PTZ)点燃癫痫发育期大鼠模型,选择大鼠行为学改变、海马结构病理形态学指标,观察银杏叶提取物(Extract of Ginkgo biloba leaves, EGb)对点燃癫痫发育期大鼠的干预作用,并探讨其干预机制之一,为拓展银杏叶提取物的临床应用提供实验依据。   方法:健康21日龄Sprague Dawley大鼠(简称SD大鼠)随机分成5组,每组确保8只:①正常NS对照组(Normal saline, NS+NS组);②PTZ+5%乙醇7天(day, d)组;③PTZ+5%乙醇14d组;④PTZ+EGb7d组;⑤PTZ+EGb14d组。观察点燃及治疗过程中各组大鼠的发作情况,以Y-型电迷宫及Morris水迷宫评价各组大鼠的认知功能,以病理方法评价海马神经细胞凋亡的表达。   结果:1.行为学变化:1.1 PTZ点燃后,PTZ点燃各组大鼠均有自发性的痫性发作,及时给予EGb治疗后,痫性发作次数明显减少(P<0.05),而EGb治疗7d与14d组大鼠痫性发作次数相互比较无统计学意义(P>0.05)。1.2 Y-型电迷宫实验结果:PTZ点燃各组较正常NS对照组大鼠学会达标次数明显增多(P<0.05),EGb治疗14d与7d组较相对应的PTZ点燃对照组大鼠学会达标次数明显减少(P<0.05),但是EGb治疗7d与14d组相互比较无统计学意义(P>0.05)。1.3 Morris水迷宫实验结果:①逃避潜伏期:各组逃避潜伏期均呈逐渐缩短趋势,但PTZ点燃各组均长于正常NS对照组(P<0.05),经EGb治疗后,逃避潜伏期明显缩短,仍长于正常NS对照组(P<0.05),而EGb治疗7d与14d组大鼠逃避潜伏期相互比较无统计学意义(P>0.05)。②搜寻策略与记忆实验结果:PTZ点燃各组大鼠靶象限活动时间百分比均低于正常NS对照组(P<0.05),EGb治疗后,EGb治疗7d与14d组大鼠在测试的第3,4天时成绩均优于单纯PTZ点燃组(P<0.05),而仍差于正常NS对照组(P<0.05),但是EGb治疗7d与14d组相互比较无统计学意义(P>0.05)。PTZ点燃各组大鼠穿越平台次数均少于正常NS对照组(P<0.05), EGb治疗7d和14d两组大鼠穿越平台次数均多于单纯PTZ点燃对照组,但仍少于正常NS对照组(P<0.05),而EGb治疗7d与14d组大鼠穿越平台次数相互比较无统计学意义(P>0.05)。2.形态学观察:2.1海马病理形态学改变:单纯PTZ点燃各组可见海马神经细胞肿胀,体积增大,典型的多角形变为圆形或三角形,胞核移位,胞质浓缩、深染、核破裂,以CA3区为著,EGb治疗后神经细胞损伤明显减轻,EGb治疗7d与14d组相互比较神经细胞无明显变化。2.2神经细胞凋亡结果:TUNEL阳性细胞主要分布在海马,以CA3区为著,单纯PTZ点燃组海马CA3区阳性细胞数明显高于正常NS对照组(P<0.05), EGb治疗后海马神经细胞凋亡较单纯PTZ点燃组明显减少(P<0.05),但是EGb治疗7d与14d组相互比较神经细胞凋亡数无统计学意义(P>0.05)。   结论:PTZ点燃癫痫可致使发育期大鼠发生认知功能降低;EGb(300mg/kg.d)治疗7d和14d均可改善发育期点燃癫痫大鼠的认知功能,但是并没有显示出14d疗程比7d疗程有明显的疗效优势;EGb改善发育期点燃癫痫大鼠认知功能可能与减少或阻断海马神经细胞凋亡有关。
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