【摘 要】
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利用经过改造的噬菌体展示载体pCANTAB5G8构建了随机十五肽展示库.随机十五肽编码序列为(NNK),其中N为等量的A、G、C、T、K为等量的G、T.编码序列的5′端引入HindⅢ位点,3′
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利用经过改造的噬菌体展示载体pCANTAB5G8构建了随机十五肽展示库.随机十五肽编码序列为(NNK)<,15>,其中N为等量的A、G、C、T、K为等量的G、T.编码序列的5′端引入HindⅢ位点,3′端引入BanhⅠ位点.十五肽编码序列经PCR扩增形成双链,双酶切后与相应酶切的载体pCANTAB5G8连接,经电击转化大肠杆菌DH5αF.利用青霉素抗性筛选得到重组转化子,根据转化率计算出库容量为1.36×10<8>.重组转分子经辅助噬菌体M13KO7超感染得到噬菌体展示随机十五肽库,滴度为4.0×10<,13>cfu.用PCR-SSCP检验了库的异质性,结果证明异质性符合要求.利用1,16-十六烷基二醇合成16-羟基十六烷基硫醇.1,ω-羟基烷基硫醇在传感棱镜表面镀金薄膜上自组装形成单层膜.然后活化膜表面的羟基,将羧甲基葡聚糖层偶联于金膜上,在金膜表面形成了一个亲水介质层.有利于低浓度收白质快速、高效地固相化金属膜的表面.用此传感棱镜进行了横向塞曼激光器基于表面等离子体(SPR)原理对蛋白质相互作用的研究.此技术可将随机多肽库用于蛋白质芯片的制备.
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