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鲜地龙平喘活性蛋白是从中药新鲜地龙中提取得到的一组蛋白组分。前期经离体动物实验研究表明具有显著的平喘作用,且起效快,提示具有重要的临床意义和良好的开发前景。
本论文在前期研究的基础上,对鲜地龙平喘活性蛋白的药效学、质量标准、稳定性进行了研究,为鲜地龙平喘活性蛋白新药制剂的开发提供药学基础研究资料。
1.鲜地龙平喘活性蛋白药效学研究
分别通过卵蛋白致敏模型以及组胺引喘模型两种方法对鲜地龙平喘活性蛋白的平喘作用进行了整体药效学研究,研究结果表明鲜地龙平喘活性蛋白0.12g/kg可以有效地抑制卵蛋白造成的哮喘,与空白对照组比较有显著性差异,与阳性药孟鲁斯特钠10mg/kg对比无显著性差异;而对组胺诱发的哮喘鲜地龙平喘活性蛋白并无明显的拮抗作用。
2.鲜地龙平喘活性蛋白质量标准的建立
利用凝胶排阻色谱法,与反相高效液相色谱法对鲜地龙平喘活性蛋白进行了定性研究,初步构建了以分子量分布以及HPLC指纹图谱为基础的活性蛋白质量标准研究方法。结果表明鲜地龙平喘活性蛋白的分子量分布90%均在一万分子量以上;通过反相高效液相色谱建立了鲜地龙平喘活性蛋白的指纹图谱,得到重现性良好的13个指纹峰,占整个指纹谱峰面积的90%以上;对鲜地龙平喘活性蛋白的总蛋白含量进行了测定,结果表明所有批次总蛋白含量均在50%以上。
3.鲜地龙平喘活性蛋白稳定性考察
在构建活性蛋白的质量标准基础上,对其进行了稳定性考察。实验结果显示:高温、高湿条件下活性蛋白的分子量分布均发生明显的改变,且反相高效色谱显示其某些指纹峰消失;光照在短时间内不会影响蛋白活性;有利于鲜地龙平喘活性蛋白稳定的环境温度应为低温,室温下长期放置会导致鲜地龙平喘活性蛋白分子量分布发生变化且反相高效色谱显示其某些指纹峰消失。