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研究目的: 1.对胆道闭锁患儿手术前后的中医证候规律进行分析,总结导师许华教授对本病研究的中医学术思想。 2.观察运用温阳活血化湿治疗胆道闭锁术后患儿的临床疗效,并从T细胞亚群、IL-12及肝功能等方面来探讨其治疗的机制。 研究方法: 1.纳入患儿选择在2012年3月至2013年1月在广州中医药大学第一附属医院胆道闭锁专科门诊及中山大学第一附属医院小儿外科诊治的胆道闭锁近期手术患儿,共23例。同时收集2006年6月至2012年12月来广州中医药大学第一附属医院儿科、中山大学附属第一附属医院小儿外科就诊的非近期胆道闭锁术后的患儿病例共44例。 2.观察、分析及总结胆道闭锁近期手术患儿术前及术后、术后4周的中医证候分布规律,总结、分析胆道闭锁非近期手术患儿病例的中医证候分布规律。 3.近期手术患儿纳入后,按随机分为两组,为联合温阳活血化湿治疗的中西组及单用西药治疗的西医组,总结术前、术后及治疗后4周,8周患儿的证候积分;并对温阳活血化湿治疗前后的T细胞亚群、IL-12及肝功能进行初步探讨。 研究结果: 1.近期手术患儿术前证候分析近期手术患儿术前按手术时患儿的日龄在60天以下、60至80天、80天以上进行分组,三组患儿的中医辨证从实证上来看,在60天以前的患儿表现出来的以湿热证为主,该组的湿热证比例为75%,之后湿热证向寒湿证转化,60天至80天患儿则亦有表现为湿热证,亦有表现为寒湿证,而80天以上组则皆表现为寒湿之证,该组寒湿证比例为100%。而血瘀和气滞证则在三个阶段中都有表现出来。从虚证上进行分析,在60天以前的患儿表现出来的虚证较少,而后虚证渐增多,而80天以上组表现出来的是气、血、阳虚皆有之,可见随着手术日龄的增加,虚证的患儿数量上增加明显。表明胆道闭锁患儿术前的中医证候演变是一个由开始以湿热证为主,逐步向寒湿证转化;并随着手术日龄的增加,气、血、阳虚逐步增多的一个过程。 2.近期手术患儿术后证候分析对于术后患儿中医证候可见湿热证仍有,但比值下降,湿热证占34.8%的比值,而气虚比值升高,气虚证占87.0%的比值。而术后4周患儿的证型分布,可见湿热证明显减少,占14.3%的比值。但气虚、阳虚证仍占主要部分,气虚证占71.4%,阳虚证占47.6%。提示本病本为阳虚之体,加之手术损伤正气可至其阳虚、气虚更甚。 3.非近期手术患儿证候分析非近期手术患儿从气血阴阳虚辨证分析,大部分患儿皆为气虚证,占比例的90.9%,而阳虚的患儿也多见,占至50.0%。而从五脏虚证来看,则脾虚证表现者最多,占93.2%,其次是肾虚患儿,占36.4%,肺虚者再次之,而肝、心虚者未见。从实证上看,气滞表现最为明显,占97.7%的比例,而其次是血瘀证,占68.2%。从虚实兼夹上分析,非近期手术患儿实证与气血阴阳虚相兼的情况中,最常见的是气虚、阳虚兼上寒湿、气滞与血瘀证。说明本病多为虚实夹杂之证,而其中又以气虚、阳虚夹杂寒湿、气滞及血瘀居多。 4.温阳活血化湿治疗的研究从证候积分表分析得出结果,表明近期手术患儿通过4周的疗程,中西医组的有效率为77.8%,而西医组的有效率为25.0%,中西医组相比较单纯西医组,其在症状改善上明显占优。特别是改善胁下肿块性质、腹胀及食欲等症状改善方面的表现明显优于西医组。从保护肝实质细胞的ALT、AST下降方面,从利胆的ALP下降方面及胆红素代谢方面的TB、DB及IB,中西组治疗后对其改善的程度也明显高于单用西医组。提示温阳活血化湿治疗可能在护肝和利胆方面有作用。 5.对T细胞亚群及IL-12的研究通过我们的实验,将术前患儿分为三组,三组患儿外周血T细胞亚群水平相比较可以看出,60天以下组的CD4+(39.56±11.48)以及CD4+/CD8+(1.94±7.22)皆比另外两组要高,而80天以上组的CD4+(28.4±8.91)、CD8+(21.94±11.05)最低。60天以下组的CD4+(39.56±11.48)、60至80天组的CD4+(36.02±9.19)与80天以上组的CD4+(28.4±8.91)在三者两两之间比较都有统计学差异(方差齐,T检验,P<0.05)。而较之正常小儿的CD4+(41.35±3.52)、CD8+(24.67±4.83)[15],60天以下组稍低,而60天以上组则有明显差异。提示CD4+随着手术日数的增加而减少。这与中医方面随着手术日龄增加而气虚、阳虚证明显增多相似。近期手术患儿术前IL-12分析,60天以下组(552.097±423.80)、60至80天组(519.131±604.815)及80天以上组(982.726±1105.686)并未出现明显随手术日增长而改变的趋势,但皆有升高,提示肝内炎症在术前就有存在,但其可能并未受手术日期的影响。非近期手术患儿通过中西医组治疗后,其IL-12较前有明显的下降,提示中药对减轻肝内炎症有一定的作用。 研究结论: 1.胆道闭锁患儿术前证候规律是一个开始由湿热证为主,之后湿热证向寒湿证转化;并随着手术日龄的增加,气、血、阳虚逐步增多的一个过程。而血瘀和气滞证则存在于各个时期之中。术后近期仍可见湿热证,但气虚明显增多。术后远期患儿最常见的是气虚、阳虚兼寒湿、气滞与血瘀证。可见本病患儿本为先天禀赋不足之体,加之胎禀湿蕴,如湿热郁蒸,久则气滞血瘀,瘀积发黄。故本病早期,其主要表现出来的是邪实为主,而其邪主要为湿热之邪。而邪气日久耗伤正气,其证候表现出来的就是由实转虚的一个过程。而手术后的患儿,更是因手术对其正气的损耗,更加表现出正气亏虚的证候。由此可见,对于术后的治疗,可予以温阳活血化湿法;而对于术前进行中医干预需根据患儿的日龄中医证候变化来调整扶正与祛邪的尺度。 2.在西医基础上加用温阳活血化湿治疗比单纯用西医治疗对胆道闭锁术后患儿的改善胁下肿块性质、腹胀及食欲等方面的表现有明显效果。在改善肝功能指标(ALT、AST、ALP、TB、DB、IB)方面也有优势。温阳活血化湿治疗的机制可能与护肝及利胆有关。 3.胆道闭锁术前患儿的CD4+比例随着手术日的延长而呈现出下降的趋势,与本病患儿阳虚、气虚证有明显的联系。IL-12术前皆有升高,提示肝内炎症在术前就有存在。 4.温阳活血化湿治疗短期内并不能改变T细胞亚群,远期是否有改变还需进一步研究。但温阳活血化湿治疗对降低IL-12,减轻肝内炎症可能有一定的作用。