【摘 要】
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从1997年起,先是设计并建立了一种快速、特异、直接和灵敏地鉴别有心肌毒性CVB3病毒株的三引物PCR方法.因基因组第234位点碱基不同(有毒的CVB为U,无毒的CVB为C),PCR扩增后凝
【出 处】
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中国预防医学科学院 中国疾病预防控制中心
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从1997年起,先是设计并建立了一种快速、特异、直接和灵敏地鉴别有心肌毒性CVB3病毒株的三引物<,RT>PCR方法.因基因组第234位点碱基不同(有毒的CVB<,3>为U,无毒的CVB<,3>为C),PCR扩增后凝胶电泳表现为:有毒的CVB<,3>在1.767kb和1.928kb处有两条带, 无毒的CVB<,3>在1.928kb处有一条带.与此同时,有人在研究柯萨厅病毒引起疾病的慢性过程机理时发现,B组柯萨奇病毒可在血管内皮细胞中低水平长期存在,并认为与一种受体有 关.他们将从克山疾病人身上分离出的B组柯萨奇病毒CVB<,2>、CVB<,4>分别各接种于人脐 静脉内皮细胞和家兔动脉血管内皮细胞中,发现病毒不仅可以增殖,还可以引起细胞病变.接着,他们将标准病毒株CVB<,3m>、CVB<,3/0>分别各接种于人脐静脉内皮细胞,结果发现CVB<,3m>也可以使细胞出现细胞病变,CVB<,3/0>虽可低水平增殖但细胞不出现病变.然后,他们将CVB<,3/0>随细胞一起1-2代后,发现细胞也可出现病变.由于CVB<,3m>和CVB<,3/0> 分别接种于人脐静脉内皮细胞后,出现的后果不同,为他们观察CVB<,3/0>体外毒性突变建 立了一种初筛方法.有了前述建立的两种方法,在此基础上,他们用一种相对缺硒的细胞培养基,人脐静脉内皮细胞在此培养基中进行维持培养,再接种并观察CVB<,3/0> 的突变.结果他们分离到一株突变且可使敏感动物Balb/C小白鼠致病.为了确定是否肠道病毒某一型( 如CVB<,3>)与克山病的发生、发展有关,他们对来自四川省冕宁县、喜德县的30名潜慢型克山病患者血标本进行检测.方法有扩增肠道病毒全基因组的长片段PCR、特异针对柯萨奇病 毒B组IgM、IgG的ELISA法以及他们建立的鉴别CVB<,3>有毒株与无毒株的PCR.他们尚不能确 定出的CVB<,3>是否由CVB<,3/0>缺硒时的突变而来.肠病毒确有参与克山病的疾病形成过程.但要确定肠道毒或某些血清型尚有待进一步研究.
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