【摘 要】
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随着转基因植物在世界范围内的大规模种植,其安全性受到日益关注,因此,转基因作物的安全性进行评价的研究,对于促进生物技术的健康有序发展有着极其重要的意义。转基因生物的
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随着转基因植物在世界范围内的大规模种植,其安全性受到日益关注,因此,转基因作物的安全性进行评价的研究,对于促进生物技术的健康有序发展有着极其重要的意义。转基因生物的安全性评价包括许多内容,非预期效应的研究是其中非常重要的方面。
转基因植物中非预期效应的产生有着复杂的遗传和环境因素,目前的检测方法主要依靠对已知的营养因子、抗营养因子和毒素等成分进行化学分析,但这些方法具有一定的缺陷,特别是可能出现未知的毒素或抗营养因子,以及在缺少有效的检测方法的情况下,这种方法具有多种局限性,为了研究非预期效应产生的机理和增加检测出非预期效应的可能性,需要采用各种不同的、更加有效的策略。为此,本文以蛋白质组学方法研究转基因水稻与常规水稻种子蛋白组以及叶片蛋白组表达谱的变化,为蛋白质组学方法在非预期效应研究中的应用奠定基础。
对转基因水稻的差异蛋白质组学分析基于双向电泳,为获得其蛋白质组表达谱的全貌,采用了24cm pH3-10的IPG预制干胶条进行第一向等电聚焦,随后进行12.5％的SDS-PAGE。经考马斯亮蓝R-350染色的双向电泳凝胶在种子蛋白组,以及在叶片蛋白质组实验的三个阶段,即一片真叶、两片真叶及三片真叶阶段,都分别检测到大约300个蛋白质点。选取差异表达的蛋白点进行质谱鉴定,发现分别与促进糖类和淀粉的合成代谢、植物抗逆性状的减弱、调控有丝分裂中G2/M期、影响蛋白质的消化、提高鳞翅目幼虫取食的抗性、改变光合速率等等有关。
蛋白质组学方法的成功应用需要建立相应的数据库。其中包括对应于转基因植物不同开发阶段和环境条件下的自然变异信息。本实验证明蛋白质组学技术在检测转基因植物的非预期效应方面很有潜力.
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