【摘 要】
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本研究构建了日本乙型脑炎病毒(JEV)PrM ΔE基因与人组织纤溶酶原激活剂(tPA)信号肽序列融合表达真核质粒pVAX-tPA-PrM ΔE,并对构建的DNA疫苗进行了初步免疫试验研究。
【机 构】
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四川农业大学 预防兽医研究所 猪病研究中心,四川 雅安 625014
【出 处】
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第四届人畜共患病学术研讨会、2014年中国狂犬病年会、中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会
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本研究构建了日本乙型脑炎病毒(JEV)PrM ΔE基因与人组织纤溶酶原激活剂(tPA)信号肽序列融合表达真核质粒pVAX-tPA-PrM ΔE,并对构建的DNA疫苗进行了初步免疫试验研究。采用RT-PCR方法和重叠PCR方法分别扩增出日本乙型脑炎病毒PrM ΔE基因和tPA信号肽序列,并分别将其克隆至pMD 19-T载体,经鉴定正确后亚克隆至真核表达载体pVAX1,构建重组质粒pVAX-tPA-PrM ΔE,对构建的重组质粒经鉴定正确后转染COS-7细胞,并利用间接免疫荧光试验检测质粒在细胞中的瞬时表达情况,同时利用制备的质粒免疫昆明小鼠,检测其JEV特异性血清IgG抗体水平、促脾淋巴细胞增长率,并以JEVCZ1株进行小鼠模型下的攻毒保护试验,进行DNA疫苗的攻毒保护率研究。
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