【摘 要】
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海绵是一种重要的海洋药源生物。为解决海绵药源“供给不足”问题，海绵细胞离体培养的研究受到了关注。本文研究海绵细胞在微载体表面的贴附特性及相关科学问题，为药源生产
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海绵是一种重要的海洋药源生物。为解决海绵药源“供给不足”问题，海绵细胞离体培养的研究受到了关注。本文研究海绵细胞在微载体表面的贴附特性及相关科学问题，为药源生产技术提供基础。论文考察了海绵细胞在商用微载体上的贴附，其中繁茂膜海绵细胞在玻璃微载体上贴附最好。对各种材料相关性能测试说明，材料-细胞亲和力、材料表面电荷及表面润湿性能对海绵细胞贴附均有影响。经光镜和电镜观察分析，在微载体上可贴附的是原细胞和上皮细胞。采用BrdU法鉴定各种样品的DNA复制能力，确认贴附细胞中存在原细胞，而未贴附细胞悬浮样品中基本不存在原细胞。研究表明，繁茂膜海绵细胞在微载体上贴附的适宜温度为18℃，适宜pH为8.2；海绵细胞的贴附过程表现为细胞浓度一级响应，其吸附平衡与细胞样品中可贴附细胞浓度及细胞与载体的相对比例密切相关。在海绵细胞与微载体的体系中，海绵细胞的贴附与聚集共存。研究发现，细胞在微载体上的贴附远快于聚集；随着体系维持培养时间的增加，细胞聚集体的颗粒直径增大，同时空载体的数量迅速增加，最终形成的则是以大细胞团或大的细胞微载体团为主的体系。进行了微载体培养的初探。24孔板中培养3天后的细胞活性测定(MTT法)表明，微载体培养系统的细胞活性高于细胞团的培养。两种体系的摇瓶培养，也表现为微载体培养较好。
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