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目的：观察HB-EGF特异性信号通路抑制剂(CRM197)对人卵巢癌敏感细胞A2780、耐紫杉醇细胞A2780/Taxol及耐顺铂细胞A2780/DDP耐药逆转的作用。
方法：人卵巢癌亲本细胞A2780、耐紫杉醇细胞A2780/Taxol及耐顺铂细胞A2780/DDP三种细胞各分为两组，即药物干预组和空白对照组。药物干预组细胞经CRM197(100ug/ml)处理48小时。倒置显微镜下观察CRM197作用前后细胞形态学变化；调整细胞浓度至105个/ml，种96孔板，每孔100ul，MTT法分别检测CRM197作用前后各细胞对紫杉醇、顺铂的半数抑制浓度(IC50)；药物干预组和空白对照组细胞按1×106个/ml接种于六孔培养板中，流式细胞技术检测细胞内Rh123的平均荧光强度，反映各组细胞P-gp泵对罗丹明123的外排能力即反映细胞P-gp泵药物外排功能。
结果：人卵巢癌敏感细胞A2780、耐紫杉醇细胞A2780/Taxol及耐顺铂细胞A2780/DDP经HB-EGF特异性信号通路抑制剂CRM197(100ug/ml)作用48小时后，倒置显微镜下观察可见细胞内出现空泡，大量细胞死亡并脱壁，悬浮在培养液中。凋亡细胞的体积变小变形，并有凋亡晚期细胞可见皱缩、变圆、脱落的凋亡小体。MTT分析法测得CRM197(100ug/ml)作用48小时后，顺铂及紫杉醇对卵巢癌亲本细胞A2780的半数抑制浓度(IC50)均明显下降(p<0.001)；顺铂对卵巢癌耐顺铂细胞A2780/DDP的半数抑制浓度(IC50)明显下降(p<0.001)；紫杉醇对卵巢癌耐紫杉醇细胞A2780/Taxol的半数抑制浓度(IC50)明显下降(p<0.001)；A2780/DDP细胞的耐药逆转倍数约为3.48，A2780/Taxol细胞的耐药逆转倍数约为3.3。流式细胞技术测得卵巢癌亲本细胞A2780及耐顺铂细胞A2780/DDP内罗丹明123平均荧光强度无明显差异(p>0.05)，耐紫杉醇细胞A2780/Taxol内罗丹明123平均荧光强度较亲本细胞A2780明显降低(p<0.001)；经过CRM197(100μg/ml)干预48h后，A2780/Taxol细胞内罗丹明123平均荧光强度较干预前出现明显的增高(p<0.001)，A2780细胞及A2780/DDP细胞内罗丹明123平均荧光强度较干预前无明显改变(p<0.05)。
结论：HB-EGF特异性信号通路抑制剂CRM197能够使紫杉醇及顺铂对人卵巢癌敏感细胞A2780和耐药细胞A2780/Taxol、A2780/DDP的半数抑制浓度(IC50)下降，从而提高了三种细胞对紫杉醇和顺铂的敏感性；CRM197可显著抑制人卵巢癌耐紫杉醇细胞A2780/Taxol内P-gp泵的药物外排功能，增加紫杉醇在细胞内的累积，有效的促进紫杉醇诱导的细胞凋亡。