【摘 要】
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该研究应用了与OPN的mRNA序列互补的反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,AS-ODN)期望能从基因水平抑制OPN的表达进而干预OPN的功能,这是该研究的目的之一.在此基础
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该研究应用了与OPN的mRNA序列互补的反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,AS-ODN)期望能从基因水平抑制OPN的表达进而干预OPN的功能,这是该研究的目的之一.在此基础上,为了使反义骨调素寡核苷酸的反义干预作用具有细胞靶向性,我们将能识别肾脏固有细胞CD44膜受体的抗体与AS-ODN连结组建CD44抗体靶向的反义骨调素寡核苷酸复合物,期望借助于膜受体介导的内化作用(receptor-mediated endocytosis)将反义骨调素寡核苷酸能靶向性导入肾脏组织并从基因水平干预OPN的表达和功能,这是该研究的目的之二.由于金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)分子量较小,稳定性良好,能与多种IgG抗体以高亲合力非共价结合,我们先将SPA同能以静电方式结合DNA的多聚赖氨酸(polylysin,PLL)共价偶联,构建SPA-PLL交联物,再以SPA-PLL交联物为"桥",将CD44抗体与AS-ODN非共价结合组建CD44抗体靶向反义骨调素寡核苷酸复合物.以上结果提示:反义骨调素寡核苷酸能从基因水平特异性抑制大鼠小管上皮细胞和系膜细胞OPN表达,并且能抑制细胞对胶原凝胶的粘附;以SPA-PLL交联物为"桥"构建的抗体靶向反义骨调素寡核苷酸复合物能靶向导入大鼠小管上皮细胞,并且能特异性抑制NRK52E细胞OPN的mRNA表达和NRK52E细胞对胶原凝胶的粘附.
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