白藜芦醇衍生物的合成及其初步细胞活性研究

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目的:合成白藜芦醇的衍生物--乙酰白藜芦醇和甲基化白藜芦醇,并对其进行结构解析;建立它们的液相色谱测定含量方法并测定脂水分配系数;观察它们对3T3-L1脂肪细胞的影响。
  方法:以白藜芦醇为原料,通过化学合成乙酰白藜芦醇和甲基化白藜芦醇,以核磁共振H谱、C谱、紫外光谱与质谱对得到的产物进行结构解析;以高效液相色谱法测定含量和脂水分配系数;细胞实验部分,实验分为空白对照组、白藜芦醇对照组、甲基化白藜芦醇组、乙酰白藜芦醇组,用MTT法测定不同浓度的甲基化白藜芦醇和乙酰白藜芦醇对3T3-L1脂肪细胞增殖的抑制作用;甲基化白藜芦醇、乙酰白藜芦醇分别处理24h和48h后,采用AnnexinV-PI双染法检测定其诱导3T3-L1脂肪细胞细胞凋亡作用,采用RT-PCR法检测定其对3T3-L1脂肪细胞中PPARγ的mRNA表达的影响。
  结果:通过结构确认,合成得到了乙酰白藜芦醇和甲基化白藜芦醇,纯度均大于99%;其脂水分配系数(25℃)分别为:LogP=1.49,4.20;细胞实验部分,与空白对照组比较,甲基化白藜芦醇组、乙酰白藜芦醇组均对3T3-L1脂肪细胞的细胞活力有明显的抑制作用,且呈浓度时间依赖关系,其IC50分别为321.8103μg/mL,103.7696μg/mL(P<0.05);甲基化白藜芦醇组、乙酰白藜芦醇组药物干预24h和48h后的3T3-L1脂肪细胞分布于Q2象限和Q4象限的比例逐渐增多,细胞凋亡率呈现上升趋势,表现出较为明显的时间依赖关系(P<0.05);与空白对照组比较,甲基化白藜芦醇组、乙酰白藜芦醇组均下调3T3-L1脂肪细胞中的PPARγmRNA的表达(P<0.05)。
  结论:乙酰白藜芦醇和甲基化白藜芦醇均有较好的脂溶性;甲基化白藜芦醇和乙酰白藜芦醇对3T3-L1脂肪细胞有抑制作用,可诱导3T3-L1脂肪细胞的凋亡,能下调3T3-L1脂肪细胞PPARγmRNA的表达水平。
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