论文部分内容阅读
第一部分妊娠期糖尿病患者Lp-PLA2的活性变化及临床意义目的分析妊娠期糖尿病（stational diabetes mellitus,GDM）患者脂蛋白相关磷脂酶A2（Lipoprotein-associated Phospholipase A2,Lp-PLA2）的活性变化及与妊娠结局的相关性,以探讨引起妊娠期糖尿病发病及导致不良妊娠结局的深层机制。方法选取2017年5月至2018年5月在连云港市第一人民医院产前门诊定期产检并入院分娩的100例孕妇作为研究对象,其中GDM组52例,正常对照组48例。采用全自动生化仪进行生化指标的检测,包括空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）等,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定Lp-PLA2活性,并计算出胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）,HOMA-IR=FPG×FINS/22.5。比较二组患者外周血Lp-PLA2活性及生化指标的变化,并对不良妊娠结局状况进行统计学分析。结果1.两组孕妇糖脂代谢指标的比较:与正常对照组比较,GDM组FPG、HbA1c、HOMA-IR、TG、TC、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显下降（P均<0.05）。2.两组孕妇Lp-PLA2活性的变化:与正常对照组比较,GDM组血清Lp-PLA2活性显著升高,差异有统计学意义（P<0.05）。3.Lp-PLA2活性与糖代谢、脂代谢指标的相关性分析:Lp-PLA2活性与HOMA-IR、TC、及LDL-C呈显著正相关（r1=0.393、r2=0.416、r3=0.531,P均<0.05）。4.两组孕妇不良妊娠结局比较:GDM组胎膜早破发生率明显高于正常对照组（P<0.05）,胎儿生长受限及巨大儿等不良妊娠结局发生率亦高于正对照组,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论GDM患者血清Lp-PLA2活性明显增加,同时伴有胰岛素抵抗及血脂代谢紊乱,提示Lp-PLA2可能通过介导血管内皮细胞功能受损、炎性改变、调节血脂代谢及增加胰岛素抵抗等机制参与GDM的发生发展,并进一步导致不良妊娠结局的发生。第二部分Lp-PLA2抑制剂对妊娠期糖尿病大鼠糖脂代谢影响的研究目标探讨Lp-PLA2抑制剂Darapladib对链脲佐菌素（STZ）诱导的妊娠期糖尿病大鼠糖脂代谢的影响,从而为妊娠期糖尿病的防治提供理论依据。方法将模型大鼠分为正常对照组（正常妊娠组）、STZ+生理盐水组（STZ诱导的妊娠期糖尿病大鼠组）、STZ+低剂量Darapladib组和STZ+高剂量Darapladib组（低剂量或高剂量Darapladib治疗STZ诱导的妊娠期糖尿病大鼠组）。用苏木精-伊红（HE）和免疫组织化学染色观察胰腺组织病理改变,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测Lp-PLA2水平,用全自动生化分析仪测定血清生化指标,并计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）和胰岛素敏感指数（ISI）,Westernblot法检测炎性细胞因子表达水平。结果1.各组大鼠妊娠结局的比较:与对照组比较,STZ+生理盐水组大鼠体重、胎鼠体重、胚胎植入数和活产数均明显降低;而Darapladib治疗组与STZ+生理盐水组相比,上述指标均增加。其中高剂量组增加更明显（P均<0.05）。2.各组大鼠胰腺组织HE染色形态学变化:与对照组比较,STZ+生理盐水组大鼠胰岛内细胞出现多量空泡,排列紊乱,胰岛周围炎细胞浸润明显;而Darapladib治疗组大鼠细胞空泡明显减少,形态相对规则,炎细胞浸润减少。3.胰岛素免疫组织化学染色:STZ+生理盐水组大鼠胰岛胰岛素阳性颗粒较少,分布较稀疏;Darapladib治疗组胰岛素阳性颗粒逐渐增多,分布逐渐致密。4.各组大鼠糖脂代谢指标的比较:与对照组相比,STZ+生理盐水组大鼠Lp-PLA2、FPG、HOMA-IR、LDL-C、FFA、TC、TG水平显著升高,ISI、HDL-C水平显著降低;相反,与STZ+生理盐水组相比,Darapladib治疗组大鼠Lp-PLA2、FPG、HOMA-IR、LDL-C、FFA、TC、TG水平均降低,而ISI、HDL-C水平升高,高剂量组大鼠上述指标改善更为明显（P均<0.05）。5.各组大鼠炎症细胞因子表达水平的比较:与对照组相比,STZ+生理盐水组大鼠子宫内膜组织中炎症细胞因子MCP-1、ICAM-1、IL-6和TNF-á的表达显著上调;此外,与STZ+生理盐水组相比,Darapladib治疗组大鼠子宫内膜组织中MCP-1、ICAM-1、IL-6和TNF-á的蛋白表达水平显著降低。其中,高剂量组上述蛋白表达水平更低（P均<0.05）。结论:Lp-PLA2抑制剂,Darapladib,可通过调节炎性细胞因子的途径,促进妊娠期糖尿病大鼠胰岛内分泌功能,降低胰岛素抵抗,增加胰岛素敏感性,改善脂质代谢紊乱并进一步改善妊娠结局,从而为临床防治妊娠期糖尿病提供新的思路。