直投式乳酸菌饲料发酵剂的研制及其发酵饲料对仔猪生长性能的影响

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gaoyangwang
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“仔猪断奶应激综合症”(Piglet post-weaning stress syndrome,PPWSS)一直是养殖场对断奶仔猪饲养和管理的最大挑战,其极易造成仔猪消化不良,胃肠道pH偏高,给肠道致病菌以可乘之机,导致腹泻发生,生长减慢。目前控制“仔猪断奶应激综合症”的主要办法是通过使用药物和抗生素,但是抗生素的使用会给人类以及环境带来相当大的问题。因此,本研究拟将无毒副作用、无残留的益生菌——乳酸菌制成一种直投式发酵剂(Direct-Vat-Set,DVS),用于饲料发酵处理,之后才饲喂断奶仔猪,旨在降低断奶后多系统衰弱综合症对仔猪生长的影响,减少疾病发生,减少抗生素的使用。 直投式酸奶发酵剂目前被广泛应用于酸奶的发酵与生产,并且获得了具大的成功。直投式发酵剂是指不需要经过活化、扩增而直接应用于酸奶发酵生产的一类新型发酵剂。这为本研究提供了新的思路,为了提高饲料发酵剂质量,从根本上避免饲料自然发酵周期长、质量波动大和食用安全性及卫生性难于保障的缺陷,促进产品及生产过程标准化,本研究开展了直投式乳酸菌饲料发酵剂的研究。 本研究旨在通过研制一种新型的直投式乳酸菌饲料发酵剂,经发酵后的饲料能改善其消化特性和营养水平,之后再饲喂仔猪以提高其生产能力,预防仔猪(哺乳或断奶)腹泻、减少仔猪断奶应激综合症等,同时具有与抗生素促生长因子相同的功能,大大节约生产成本,减少抗生素的使用,为绿色养殖提供新思路。 1、在原有生理生化实验鉴定的基础上,对实验室保存的一株乳酸杆菌株LH1F在分子生物学层面上进行归类,使用目前比较常用也比较准确的16S rRNA测定方法。经过同源性比对分析,确认这株乳酸杆菌株LH1F属于猪源唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius strain LH1F)。 2、从微观角度和粘附机理方面研究了唾液乳杆菌株LH1F对两种模型细胞肠道上皮CaCo-2细胞及猪肾PK15细胞的粘附效果,发现唾液乳杆菌株LH1F能特异性地粘附于模型细胞周围,并且具有浓度和时间效应。实验证明采用51g cfu/mL的菌液浓度作用于模型细胞120 min可以达到满意的实验效果。同时发现唾液乳杆菌株LH1F选择性粘附肠道细胞,并通过占位效应竞争性抑制致病菌的粘附。 3、通过正交优化唾液乳杆菌株LHlF最佳增菌培养基配方为:番茄汁,50 mL;葡萄糖,25 g;酵母膏,5 g;蛋白胨,10 g;水,1000 mL;柠檬酸二铵,2 g;吐温80,1 mL:MgSO4·7H2O,0.58 g;MnSO4·4H2O,0.25 g;CaCO3,6 g。培养后细胞浓度可达14lg cfu/ml。最佳的冷冻保护剂配方为:奶粉2.5%,甘油1%,葡萄糖2.5%,蔗糖1%,Vc2.5%。冻干后的发酵剂保存于4℃中,三个月后活菌数基本能保持在12 lg cfu/g。最佳制备条件为4℃,4,000 r/min,20 min离心获得菌体后直接真空冷冻干燥6 h。 4、应用0.05‰直投式乳酸菌饲料发酵剂接种于仔猪的基础饲粮,再补加40%过夜自来水,30℃发酵8h,pH降至4.4左右。发酵后的基础饲粮游离磷比发酵前提高了63.5%,改善了植酸磷的可利用水平,使发酵饲料可以减少添加植酸酶,降低饲料成本。发酵前后饲料中的蛋白样物质的分子量分布有较大的变化,发酵后在8KDa~45KDa之间有明显条带,并且在35KDa处有一新增亮带。说明蛋白质被唾液乳杆菌降解利用,成为小分子的胨或肽,更有利于仔猪的消化吸收。 5、试验选用90头32日龄断奶长白仔猪,按体重相近随机分成三组,每组30头,分别为对照组Ⅰ饲喂基础饲粮、对照组Ⅱ饲喂湿拌料(40%过夜自来水+60%基础饲粮),和试验组(40%过夜自来水+60%基础饲粮+0.05‰]直投式乳酸菌饲料发酵剂)。试验组饲料先进行约8小时的发酵,pH降至为4.0左右,之后再饲喂仔猪。试验为期一个月。试验结果表明,对照组Ⅰ、对照组Ⅱ和试验组仔猪平均日增重分别为:0.36 kg、0.36 kg和0.41kg,比对照组Ⅰ及对照组Ⅱ均高13.9%(P<0.01),差异极显著;料肉比分别为:1.84、1.99和1.55,同对照组Ⅰ和Ⅱ相比,试验组料肉比分别下降了21.7%(P<0.05)和13.9%(P<0.05),差异显著;腹泻率比对照组Ⅰ低50%,比对照组Ⅱ低75%;发酵试验组仔猪粪便中大肠杆菌数减少,乳酸菌数目大大增加,改善了仔猪肠道微生态平衡,降低了肉类制品被致病菌污染的风险,提高了肉类食品的屠宰前的安全性。另外,生产经济效益显著,试验组的头均毛利比对照组Ⅰ提高了25.8%,比对照组Ⅱ提高了41.6%。因此使用乳酸菌发酵饲料能明显改善断奶仔猪生长性能,提高饲料转化率,减少腹泻发生,降低仔猪“仔猪断奶应激综合症”的负面影响,提高养殖经济效益。
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