重组人CNB的发酵表达与纯化工艺及其重组质粒稳定性研究

来源 :北京师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cugll2008
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钙调磷酸酶(Calcineurin,CN)是目前所知唯一依赖Ca<2+>/CaM的ser/thr蛋白磷酸酶.该酶由A、B二亚基以1:1的比例组成异二聚体,A亚基(CNA)是催化亚基;B亚基(CNB)是调节亚基,能促进CNA的活性,且分子量小,性质稳定.生物学功能研究表明CNB能明显抑制肿瘤生长,而延长荷瘤小鼠的生存期.细胞学实验发现CNB能刺激T细胞增殖,促进NK细胞活性等.由此确定了CNB作为抗肿瘤药物的良好前景.为了开发应用CNB,该室已构建了CNB的基因工程表达系统,在大肠杆菌中得到表达.在试验室研究的基础上,进行了表达CNB的中试发酵工艺研究和纯化方面的探讨.通过对大肠杆菌表达CNB的发酵和纯化工艺及其重组质粒稳定性的研究,完成了对CNB摇瓶培养的初次放大(小型中试)和实验室水平的纯化,从而为CNB的大规模生产和实际应用奠定了基础.
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