紫金牛抗氧化活性成分研究

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紫金牛Ardisiajaponica(Thunb.) Blume,为紫金牛科草本植物,别名又称平地木、矮地茶[1]。紫金牛为我国民间常用的中草药,主要有止咳平喘作用,经药理实验和临床验证,认为紫金牛对急慢性支气管炎有很好的疗效,紫金牛除有止咳平喘作用外,还具有抗菌抗病毒作用[2]。截至到目前,从该属种分离出了苯酚类、皂苷类、香豆素类、苯醌类,黄酮类、酯类等多种化合物[3,4]。  本实验对紫金牛的地上部分的醇提物二氯甲烷及乙酸乙酯萃取物进行分离,采用正、反相硅胶色谱柱法,葡聚糖凝胶色谱柱等方法,最后得到8个单体化合物。根据理化性质,核磁共振、质谱等现代波谱学方法分析鉴定出8个化合物,分别为槲皮素,槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(Quercitrin),杨梅素-3-O-α-L-鼠李糖苷(Myricitrin),山萘酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(Afzelin),没食子酸[8](Gallic acid),槲皮苷(Quercetin),岩白菜素,β-谷甾醇和α-香树醇,并运用DPPH自由基体系体外筛选紫金牛活性部位及评价单体化合物的自由基清除活性。首先在DPPH抗氧化活性筛选实验中,选用DPPH(1,1-二苯基-2-苦肼基自由基),DPPH对紫金牛的乙醇提取物、醇提物的二氯甲烷萃取物、乙酸乙酯萃取物和水层部分等4个部位进行体外抗氧化活性筛选。结果显示,四个部位都有抗氧化活性,在浓度为500μg·mL-1,自由基的清除率都达到了80%以上,在浓度梯度下降的过程至31.3μg·mL-1时紫金牛醇提物的乙酸乙酯萃取物的清除率和二氯甲烷的萃取物清除率都达到30%以上,可以判断紫金牛醇提物的乙酸乙酯萃取物和二氯甲烷萃取物具有良好的抗氧化活性。此外对所分离得到的8个单体化合物也进行了体外抗氧化能力的测定,Compound1-8在浓度为500μg·mL-1的时候,其自由基清除率均超过了35%,表明这些单体化合物有一定的抗氧化活性,对清除率超过50%的化合物继续进行测定,化合物没食子酸,槲皮素,槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷和山萘酚-3-O-α-L-鼠李糖苷显示出较强的抗氧化能力,在浓度降至7.31μg·mL-1时,其自由基清除率分别达到50.9%,30.3%,39.1%,6%,计算出其IC50值分别为为3.14μM,12.6μM,15.3μM,45.6μ M。
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