【摘 要】
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目的：检测P388D1细胞表面是否表达有功能的P2X7受体，证明P2X7受体与P388D1细胞表面表达的CD44分子间的相关性，进一步探讨P2X7受体与肿瘤细胞转移的相关性。方法：为了研究P388D1细胞中P2X7受体表达情况及P2X7受体的活性，作者等采用RT-PCR、Westernblotting、免疫荧光从基因及蛋白水平检测P2X7受体表达情况，采用显微镜观察激动剂刺激后细胞膜变化的方法对P
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目的：检测P388D1细胞表面是否表达有功能的P2X7受体，证明P2X7受体与P388D1细胞表面表达的CD44分子间的相关性，进一步探讨P2X7受体与肿瘤细胞转移的相关性。
方法：为了研究P388D1细胞中P2X7受体表达情况及P2X7受体的活性，作者等采用RT-PCR、Westernblotting、免疫荧光从基因及蛋白水平检测P2X7受体表达情况，采用显微镜观察激动剂刺激后细胞膜变化的方法对P2X7受体的活性进行检测；为了研究P2X7受体被其激动剂ATP活化后与P388D1细胞表面表达的CD44分子相关性，作者等应用流式细胞术检测ATP作用后P388D1细胞表面CD44分子平均荧光强度的改变；为了明确ATP刺激后P388D1细胞表面CD44分子荧光强度的改变是由P2X7受体介导，作者等应用流式细胞术检测使用P2X7受体的特效拮抗剂KN-62预处理的P388D1细胞表面CD44分子平均荧光强度的变化；为了证明P2X7受体与肿瘤细胞转移之间的相关性作者等采用Transwell体外迁移实验比较ATP作用前后P388D1细胞迁移率的变化。
结果：RT-PCR、Westernblotting、免疫荧光结果均证明P388D1细胞表面表达P2X7受体。显微镜观察激动剂刺激后，细胞膜膜泡形成证明P388D1细胞表达的P2X7受体有活性。ATP时间组和剂量组的流式细胞仪结果均证明P388D1细胞经P2X7受体激动剂ATP作用后细胞表面CD44分子的平均荧光强度显著降低，即CD44分子表达量降低。应用P2X7受体的特效拮抗剂KN-62抑制P2X7受体的活性后，ATP未能导致P388D1细胞表面CD44分子平均荧光强度降低，此结果表明，ATP作用P388D1细胞后导致CD44分子表达量的降低是由P2X7受体介导的。Tanswell体外迁移实验的结果证明P2X7受体被ATP活化后能够降低肿瘤细胞的迁移率。
结论：P2X7受体经ATP作用后使P388D1细胞表面表达的CD44分子的量显著降低，同时肿瘤细胞的转移能力亦随之减弱。但其作用机制还有待进一步证明。结果提示P2X7受体具备作为肿瘤治疗的靶点潜力。
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