【摘 要】
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目的:研究莲心碱对HERG通道电流及蛋白表达量的影响;探讨莲心碱抗心律失常作用的机制。
方法:(1)采用全细胞膜片钳技术,在稳定表达HERG基因的HEK293细胞中,研究莲心碱对
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目的:研究莲心碱对HERG通道电流及蛋白表达量的影响;探讨莲心碱抗心律失常作用的机制。
方法:(1)采用全细胞膜片钳技术,在稳定表达HERG基因的HEK293细胞中,研究莲心碱对HERG电流和HERG通道动力学的影响;(2)采用Western Blot和细胞免疫荧光染色等分子生物学实验技术,研究莲心碱对HERG通道蛋白表达的影响。
结果:(1)莲心碱浓度依赖性的抑制HERG尾电流,IC50为7.914±1.141(Hill=-0.8504±0.09540)μmol/L。(2)在通道动力学方面的影响表现在以下几个方面:30μmol/L莲心碱灌流前后,不同电压下激活和失活程度无显著差别(P>0.05);10μmol/L莲心碱能使去激活时间常数明显延长,去激活速度减慢;30μmol/L莲心碱给药前后使稳态失活曲线没有显著改变;但是稳态失活时间常数在-120mV~-10mV电压下明显减小,失活速度加快;在-50mV~+30mV电压下,30μmol/L莲心碱使瞬时失活时间常数明显减小,失活速度加快(P<0.001);在-70 mV~10mV电压下,30μmol/L莲心碱使复活时间常数明显减小(P<0.05),复活速度加快。(3)莲心碱(3,10和30μmol/L)使HERG通道蛋白表达增加(P<0.05)。
结论:莲心碱能浓度依赖性的抑制HERG电流,莲心碱能与HERG通道的开放和失活状态结合,而且更趋向于结合失活状态:莲心碱3,10和30μmol/L可使HERG蛋白表达增加。
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