【摘 要】
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本研究的目的是对由SaiduKanu等研制的一种对离子载体类抗球虫药有耐药性的艾美尔球虫多价苗免疫肉鸡实验室安全性做出评价，并利用特异PCR对3种艾美尔球虫(Eimeriatellena
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本研究的目的是对由SaiduKanu等研制的一种对离子载体类抗球虫药有耐药性的艾美尔球虫多价苗免疫肉鸡实验室安全性做出评价，并利用特异PCR对3种艾美尔球虫(Eimeriatellena，E.maxima和E.acervulina)进行基因组DNA的鉴别，为进一步研究三种球虫的分子遗传特征奠定基础。
本研究使用的球虫苗是由SaiduKanu等选育的柔嫩艾美尔、巨型艾美尔、堆型艾美尔三种球虫的耐药性早熟株孢子化卵囊混悬液组成，具有致病力弱而免疫原性强的特点。将三种早熟株分别按2：1：2的比例配成多价苗，每mL含有12,500个孢子化卵囊，1mL为一倍剂量，依此类推。将240只粤黄鸡(雄)平分为8个处理组：1—空白对照组；2—不免疫攻毒组；3—一倍剂量两次免疫攻毒组；4二倍剂量两次免疫攻毒组；5—五倍剂量两次免疫攻毒组；6—十倍剂量两次免疫攻毒组；7—添加抗球虫药物攻毒对照组；8—一倍倍剂量一次免疫攻毒组。每组10只鸡，每个处理组重复2次。用混悬在10﹪羧甲基纤维素钠溶液中的球虫苗以滴注方式接种，一免日龄为5日龄，二次强化免疫为12日龄，除1组外，二次强化免疫2周后以父母代毒株攻虫，按200,000个孢子化卵囊/只的剂量攻毒。
另一方面，本项研究利用经单卵囊接种分离法获得鸡柔嫩艾美尔、巨型艾美尔、堆型艾美尔球虫卵囊，每个种两个株，一个为早熟株，另一个为强毒株。经纯化、提取基因组DNA后，用Fernandez等(2003)报道的种特异引物Tn-01、Mx-01、Ac-01做PCR扩增分析，以确定是否为纯种。
利用Wayne等(2000)报道的引物WW1和WW4r，对第二部分研究中经特异PCR鉴定为纯种的鸡巨型艾美尔球虫早熟株的特异PCR扩增产物进行rDNAITS的PCR扩增、克隆及序列分析。
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