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奶牛乳腺炎是世界范围内影响奶牛业最大的疾病。在众多能引起奶牛乳腺炎的病原中,S.aureus是危害最大的。由于抗生素的滥用和疫苗等生物制品的不健全导致乳腺炎的防治非常困难,而根本的原因还在于现阶段人们对S.aureus乳腺炎的感染损伤机制还不清楚,因此探索S.aureus乳腺炎发生、发展与转归的分子机制迫在眉睫。中性粒细胞是奶牛乳腺抵御病原菌侵袭的第一道防线,它的凋亡对于控制乳腺炎症的发展和转归至关重要,在解除奶牛不良炎性反应中发挥重要作用。为了探索奶牛S.aureus乳腺炎发生时中性粒细胞凋亡的分子机制,找到调控中性粒细胞凋亡的相关基因,本实验在体外37℃,5%C02的条件下培养从奶牛外周血中分离到的中性粒细胞,向培养基中以50：1的比例加入处于对数生长期的S.aureus,分别在共培养Oh,2h,4h,6h,8h,10h后用PITC/PI双染法通过流式细胞术检测中性粒细胞凋亡情况。最后利用基因芯片技术筛选出与中性粒细胞凋亡相关的基因,并通过qPCR对芯片结果加以验证。实验所得结果有以下几个方面：1、中性粒细胞体外培养存活情况体外培养的中性粒细胞的活细胞比例随着培养时间的延长不断下降,培养Oh时为100%,培养10h后活细胞比例降为80%,培养28h后降至50%。2、S.aureus诱导中性粒细胞凋亡情况在第Oh,2h,4h,6h,8h和10h检测中性粒细胞凋亡,实验组细胞凋亡率相比于对照组均存在极显著差异,差异值分别为3.31%,4.63%,6.77%,8.83%,8.12%和6.35%,其中诱导时间为6h时凋亡率差异最大。3、基因芯片结果与凋亡相关的差异表达基因共有4个,其中上调表达的为Bcl-2,它的上调表达倍数为2.4847；下调表达的有IL1-α, IL1-β和IL1-R1,下调表达倍数分别为0.2125,0.2062和0.3082。4、qPCR验证结果qPCR结果与芯片结果一致的有ILl-α, ILl-β和IL1-R1三个基因,而Bcl-2与芯片结果相左,表现为下调表达。通过以上结果能得到如下结论：1、中性粒细胞在体外环境下能够自发凋亡,存活时间较短；2、S.aureus能够诱导体外培养的中性粒细胞凋亡,而且在10h的诱导时间内凋亡率的变化是极显著的；3、调控中性粒细胞凋亡的基因主要为原癌基因Bcl-2, IL1及其受体。4、芯片结果比较可信。