一株放线菌发酵产物抗肿瘤活性的研究

来源 :中国科学院成都生物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:notfeet
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本学位论文主要研究一株放线菌发酵产物的抗肿瘤活性。先对该株放线菌进行活化培养,然后进行大批量发酵,发酵液经过冷冻离心,对离心得到的沉淀和上清液用不同极性的有机溶剂进行萃取,得到六个浸膏样品。对六个样品进行初步抗肿瘤活性检测。然后对活性浸膏进行分离纯化和活性跟踪。本论文主要进行了如下的工作:   1、对菌种进行活化培养,利用该菌株在28℃,200r.min-1条件下进行发酵实验,发酵时间为72h,发酵总量为15L。发酵液经过离心得到上清液和沉淀两部分。   2、分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取沉淀和上清液,得到编号为1—6的六个浸膏样品,对六个浸膏样品进行初步的细胞毒性和抗HepG2肿瘤活性实验,得出结论为5号样品活性最高。在没有分离纯化的情况下GI50达到0.76μg/mL。   3、对5号样品进行TLC实验,找出能够较好分离5号样品中各组分的溶剂组合,最后得出在氯仿:甲醇=8:1时分离效果较好。然后利用氯仿:甲醇=8:1的溶剂组合作为洗脱剂对5号样品进行过硅胶柱分离纯化并进行活性跟踪分离。   4、对分离纯化后得到的样品进行活性跟踪和结构分析。分离后得到样品A,在其浓度为10μg/ml时,抗肿瘤实验细胞的生长率为73.5%。在浓度为1.0mg/ml时,抗单纯疱疹病毒率(HSVII)为74.5%。结构分析得知其分子式最可能为C41H43N8O4。
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