论文部分内容阅读
本试验通过在日粮中添加中药及复方,研究热应激对蛋鸡的血液生化指标、肝组织抗氧化功能、肝脏热休克蛋白70表达及肝细胞凋亡的影响,初步探讨其调控机制,为进一步开发具有提高机体热耐受力的抗热应激中药制剂提供理论依据。
试验选用350只60周龄健康的海兰白蛋鸡,随机分成7个处理组,每组50只鸡,试验1～6组为热应激组,第7组为常温对照组。其中,试验1～4组日粮中分别添加1％中药复方1、1%中药复方2、1%中药复方3、1%紫锥菊,试验5组日粮中添加0.1%电解多维,试验6组为热应激对照组。预试期10天,调整鸡只的采食量、产蛋率无明显差异后,开始正式试验,正试期56天。在试验第14、28、42、56d分别取样4次,每组随机取5只鸡,采血后分离血清,用于血生化指标的测定。生化指标的测定项目主要包括:ALB、TP、T-BIL、ALT、AST、ALP、GOT;在试验第14、28、42、56d每组分别取5只鸡,空腹剖杀取适量肝脏组织用于抗氧化指标、热休克蛋白表达、肝细胞凋亡相关基因蛋白表达的测定。抗氧化指标的测定项目包括:SOD、MDA、GSH-Px、T-AOC、CAT、XOD;肝脏热休克蛋白表达采用半定量RT-PCR方法和ELISA方法;本试验采用凝胶电泳测定热应激对蛋鸡肝脏损伤的影响,肝细胞凋亡相关基因蛋白表达采用ELISA方法进行测定,测定指标主要有P53、Bax、Caspase3、bcl-2。主要试验结果如下:
(1)热应激可导致蛋鸡血清TP、ALB浓度下降,T-BIL浓度上升,中药复方和电解多维均可提高血清TP、ALB浓度,降低血清T-BIL,浓度;热应激可导致蛋鸡血清ALT、AST、GGT活性升高,ALP活性降低,中药复方2、中药复方3、紫锥菊、电解多维均可降低血清ALT、AST、GGT活性,提高血清ALP活性。
(2)热应激可导致蛋鸡肝组织SOD、GSH-Px、CAT活性和T-AOC水平下降,XOD活性和MDA含量增加;中药和电解多维可提高肝脏组织SOD、GSH-Px、CAT活性和T-AOC水平,降低XOD活性和MDA含量,说明中药和电解多维均可以促进热应激条件下蛋鸡肝组织抗氧化能力的恢复,从而有效地清除体内过多的自由基,缓解自由基及其产物所引起的损伤。其中以复方1组的效果优于其他用药组。
(3)热应激可导致蛋鸡肝脏HSP70mRNA水平和HSP70含量升高,随着热应激时间的延长,高温对照组HSP70mRNA水平和HSP70含量呈逐渐下降趋势;中药复方可提高蛋鸡肝脏HSP70mRNA水平和HSP70含量,且中药复方组HSP70mRNA水平和HSP70含量均维持在相对稳定的水平。
(4)热应激可导致蛋鸡肝脏损伤及凋亡相关蛋白P53、Bax、Caspase-3的表达量增加,bcl-2含量下降;中药和电解多维可缓解热应激导致的肝脏损伤,肝脏凋亡相关蛋白bcl-2的含量增加,P53、Bax、Caspase-3的水平下降,结果表明中药和电解多维具有抗热应激诱导的肝细胞凋亡,发挥保护肝脏和抗热应激的效果。