尖镰孢不同专化型的鉴定与遗传多态性分析

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:sunyanzi168168168
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尖镰孢(Fusarium oxysporum Schl.)是一种土传病原真菌,遍布全球,它的寄主范围相当广泛。根据其寄主专化性可分为不同的专化型。一直以来对于多种尖镰孢专化型的鉴定没有简单有效的方法。本研究通过致病力测定法鉴定出几种尖镰孢专化型。以这几种专化型为基础:首先,测定它们的脂肪酸组成及含量并建立以脂肪酸为指标的判别模型;其次,开发尖镰孢基因组SSR引物并测定已知专化型菌株的基因型,判断不同专化型菌株基因型间的异同。旨在筛选新的生物标记或分子标记用于鉴定尖镰孢专化型。进一步利用SSR引物分析了不同寄主尖镰孢菌株间的遗传关系,了解尖镰孢种内的遗传多样性,为枯萎病的防治提供一定的理论基础。主要研究结果如下:1.从保定市各县采集豇豆、番茄、黄瓜、茄子、甜瓜、苦瓜、辣椒和笋瓜等8种植物枯萎病菌株150株,分离得到130株镰刀菌。利用形态学方法和尖镰孢特异引物FOF1/FOR1对镰刀菌进行鉴定,得到100株尖镰孢。2.9种不同寄主共58株尖镰孢进行致病力测定,得到36株共7种专化型的尖镰孢菌株,包括:豇豆专化型(6株)、棉花专化型(6株)、番茄专化型(5株)、黄瓜专化型(4株)、茄子专化型(4株)、甜瓜专化型(6株)、马铃薯专化型(5株)。3.测定7种专化型共36株尖镰孢的脂肪酸组成及含量,利用SPSS软件建立了4种脂肪酸标记模型:番茄专化型判别模型为Y1=-157.750+2.809X1+3.391X2+8.099X3;棉花专化型判别模型为Y2=-178.343+0.586X1+7.587X2-0.214X3;黄瓜专化型判别模型为Y3=-129.132+2.749X1+4.163X2+4.476X3;茄子专化型判别模型为Y4=-201.307+2.016X1+7.345X2+2.400X3。判别式中3个因子分别为C18:1CIS9(W9)[X1],C18:2 CIS 9,12/18:0a[X2]和C18:00[X3]。这4个专化型模型可用于鉴定番茄、棉花、黄瓜和茄子等尖镰孢专化型。4.基于番茄专化型尖镰孢菌株(4287)基因组开发并设计出26对SSR引物,用不同专化型菌株进行验证,得到11对具多态性的SSR引物。5.利用11对SSR引物分析60株不同寄主尖镰孢菌株的遗传多态性,发现不同寄主尖镰孢间存在明显的遗传分化。且SSR基因型与菌株对寄主的致病性之间具有相关性。
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