论文部分内容阅读
大蒜（Allium sativum L.）是重要的药食兼用植物，在世界各地普遍栽培。大蒜栽培种主要利用鳞茎进行无性繁殖，因此极易造成病毒积累。通过组织培养技术脱毒是大蒜品种提纯复壮的有效手段，但是大蒜试管苗培养过程中玻璃化现象严重，因此对玻璃化机理的研究具有重要的理论意义与应用价值。近年来的研究表明，试管苗玻璃化过程中存在不同程度的氧化胁迫。与正常试管苗相比，玻璃化苗的O2·-产生速率和H2O2含量均提高，脂质过氧化程度增强，保护酶调节功能紊乱，说明试管苗玻璃化与活性氧代谢相关。
本试验以大蒜品种‘二水早’为试材，研究了外源H2O2对大蒜试管苗玻璃化及活性氧代谢动态变化的影响，外源H2O2和AsA作用下内源活性氧的产生和定位，以及活性氧清除剂.AsA对外源H2O2诱导下大蒜试管苗玻璃化及活性氧代谢动态变化的影响，从而进一步明确活性氧代谢与大蒜试管苗玻璃化的关系，从活性氧代谢的角度探讨大蒜试管苗玻璃化的机理，为试管苗玻璃化的控制提供理论依据。主要研究结果如下：
1.H2O2胁迫影响试管苗生长，2.0 mmol·L-1 H2O2处理显著促进试管苗玻璃化的发生；在H2O2胁迫下，试管苗SOD、POD、CAT和APX活性先升高后降低，MDA和膜透性水平明显提高。说明氧化胁迫可诱导试管苗玻璃化，脂质过氧化可能是试管苗玻璃化的诱因之一。
2.O2·-和H2O2的组织化学染色结果表明，各处理下活性氧产生和积累的区域均主要集中在试管苗叶片和假茎。亚细胞定位结果表明，H2O2主要积累在靠近叶绿体一侧的细胞壁及细胞间隙。外源H2O2胁迫下大蒜试管苗内源活性氧产生和积累量较多，外源H2O2+AsA处理与正常培养条件下内源活性氧产生和积累量较少。
3.添加活性氧清除剂AsA，能诱导外源H2O2胁迫下试管苗保护酶活性增强，抗氧化物质含量提高，O2·-产生速率和内源H2O2含量降低，MDA含量减少，膜透性下降，表明AsA能有效减缓由H2O2胁迫诱导的活性氧的伤害作用，从而显著降低试管苗玻璃化的发生。
本试验以大蒜品种‘二水早’为试材，研究了外源H2O2对大蒜试管苗玻璃化及活性氧代谢动态变化的影响，外源H2O2和AsA作用下内源活性氧的产生和定位，以及活性氧清除剂.AsA对外源H2O2诱导下大蒜试管苗玻璃化及活性氧代谢动态变化的影响，从而进一步明确活性氧代谢与大蒜试管苗玻璃化的关系，从活性氧代谢的角度探讨大蒜试管苗玻璃化的机理，为试管苗玻璃化的控制提供理论依据。主要研究结果如下：
1.H2O2胁迫影响试管苗生长，2.0 mmol·L-1 H2O2处理显著促进试管苗玻璃化的发生；在H2O2胁迫下，试管苗SOD、POD、CAT和APX活性先升高后降低，MDA和膜透性水平明显提高。说明氧化胁迫可诱导试管苗玻璃化，脂质过氧化可能是试管苗玻璃化的诱因之一。
2.O2·-和H2O2的组织化学染色结果表明，各处理下活性氧产生和积累的区域均主要集中在试管苗叶片和假茎。亚细胞定位结果表明，H2O2主要积累在靠近叶绿体一侧的细胞壁及细胞间隙。外源H2O2胁迫下大蒜试管苗内源活性氧产生和积累量较多，外源H2O2+AsA处理与正常培养条件下内源活性氧产生和积累量较少。
3.添加活性氧清除剂AsA，能诱导外源H2O2胁迫下试管苗保护酶活性增强，抗氧化物质含量提高，O2·-产生速率和内源H2O2含量降低，MDA含量减少，膜透性下降，表明AsA能有效减缓由H2O2胁迫诱导的活性氧的伤害作用，从而显著降低试管苗玻璃化的发生。