“DCs/C6瘤苗”对T细胞活性、胶质瘤生物学行为的影响

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sunyanjun03
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目的:检测并探讨大鼠C6胶质瘤细胞与正常大鼠外周血树突细胞(DCs)的融合细胞(DCs/C6融合瘤苗)对T细胞杀伤靶细胞能力的影响,及对大鼠胶质瘤模型生存期的影响。  方法:抽取健康Wistar大鼠外周血,体外培养、提取并分离树突细胞(DCs),应用聚乙二醇法(PEG)将树突细胞与大鼠C6胶质瘤细胞融合,制备DCs/C6融合瘤苗;应用流式细胞仪及免疫荧光双标法检测DCs/C6融合细胞表型并计算融合率;应用CytoTox96?非放射性细胞毒性检测试剂盒分别检测DCs细胞组、C6细胞组、DCs/C6共培养细胞组、DCs/C6融合细胞组细胞毒性T细胞(CTL)杀伤靶细胞的能力;建立大鼠颅内胶质瘤模型,接种肿瘤细胞后常规饲养6天,分别从鼠尾静脉注入自体培养的DCs/C6融合细胞、DCs细胞,饲养2周后,MRI检测肿瘤生长情况。  结果:流式细胞仪及免疫荧光双标法检测结果显示,DCs表达人类主要组织相容性复合体-Ⅱ(HLA-DR),C6表达神经胶质酸性蛋白(GFAP),DCs/C6融合细胞即表达HLA-DR又表达GFAP; CTL活性检测结果表明DCs/C6融合细胞诱导CTL杀伤靶细胞的能力强于其他各组,约为(66.19±4.27)%,p<0.05;MRI显示DCs/C6融合瘤苗注射组肿瘤平均体积小于DCs细胞(p<0.05);生存期的分析结果显示,融合细胞组中位生存时间为46.42天,C6细胞组的中位生存时间为25.50天,融合细胞组生存期长于C6细胞组(p<0.001)。  结论:肿瘤细胞与树突细胞能够融合成一个杂合细胞,即DCs/C6,同时表达树突细胞与肿瘤细胞表型。DCs/C6融合细胞可激活T细胞,促进T细胞的增殖,增加T细胞对肿瘤细胞的杀伤能力。免疫治疗(即DCs/C6融合瘤苗注射)可能会减慢肿瘤细胞的生长速度,延长胶质瘤患者生存期。
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