人骨髓间充质干细胞的分离与培养

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目的:建立有效分离和简便鉴定骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,并观测不同条件对骨髓间充质干细胞生长的影响,为更进一步研究骨髓间充质干细胞的生物学特性提供理论基础和实验手段.方法:用密度为1.073g/ml的percoll从骨髓血中分离单个核细胞,利用贴壁筛选的原理,在含10﹪胎牛血清的DMEM培养条件下,对获得的同源细胞群进行免疫细胞化学、电镜和流式细胞仪检测;并在培养基中加入成骨添加剂,观察细胞的成骨潜能;同时观察高糖和低糖培养基以及纤维连接素对间充质干细胞生长的影响.结论:percoll梯度离心和贴壁筛选是获得骨髓间充质干细胞的有效方法;免疫细胞化学方法、电镜、流式细胞仪及反向成骨诱导方法的联合应用能够准确鉴定MSCs.低糖DMEM是MSCs培养和扩增的适宜培养基.纤维连接素影响MSCs的生长特性,促进MSCs的贴壁和增殖.
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