【摘 要】
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肿瘤基因治疗的关键是目的基因能否在体内被有效的导入特定的肿瘤组织细胞,并实现靶向高效表达.解决这一问题的主要策略是通过利用肿瘤组织/细胞特异性启动子调控治疗基因靶
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肿瘤基因治疗的关键是目的基因能否在体内被有效的导入特定的肿瘤组织细胞,并实现靶向高效表达.解决这一问题的主要策略是通过利用肿瘤组织/细胞特异性启动子调控治疗基因靶向表达.但目前发现肿瘤组织/细胞特异性启动子在嵌合基因中通常存在活性较低的问题.近年来几项研究结果显示,2.4kb L-plastin启动子不仅具有肿瘤细胞特异性,而且启动目的基因表达的活性也较高.L-plastin启动子还能提高肿瘤细胞对放化疗药物的敏感性.由于p16基因具有失活涉及肿瘤范围广、改变频率高、作用CDK4特异性强以及基因小易于操作等优点,因此,它作为CDK的小分子抑制剂,在肿瘤治疗方面有良好的应用前景,成为人们进行肿瘤基因治疗的靶基因之一.大量实验结果证明,基于恢复p16基因功能的肿瘤基因治疗,能够产生很好的抑瘤效应,在肿瘤治疗方面具有广阔的应用前景.但目前的p16基因治疗也存在缺乏肿瘤细胞特异性的问题,从而影响了p16基因抑瘤效应的发挥.为此,该研究用2.4kb L-plastin启动子构建了真核表达载体pcDNA3.1PLN,并且分别重组了报告基因GFP,以及治疗基因p16,通过细胞转染实验、流式细胞术、Western blot、细胞生长增殖特性分析等对表达载体的肿瘤细胞特异性和活性及p16的表达、抑瘤效应等进行了研究.
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