模拟微重力对人牙髓干细胞在裸鼠体内增殖能力的影响

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zguohui69
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目的:研究模拟微重力(simulated microgravity, SMG)对人牙髓干细胞(humanDental Pulp Stem Cells,hDPSCs)在裸鼠体内增殖能力的影响。  方法:取冻存的人牙髓干细胞进行复苏并传代培养,选取大小为5×5×4mm3的PLGA支架,将上述细胞悬液接种于支架上,随即放入细胞培养箱中培养24h。将细胞支架复合物随机分为两组,模拟微重力培养组和常规重力培养组,两组分别在37℃、5%CO2细胞培养箱中培养3天。随后分别将实验组和对照组植入裸鼠皮下,4周后取出组织块,行HE染色、Masson三色染色、Ⅰ型胶原和Ki67免疫组化染色,观察细胞密度、胶原生成量、Ⅰ型胶原表达量和Ki67阳性细胞数量。实验数据运用SPSS13.0统计软件进行数据分析,细胞体内增殖能力组内行重复测量方差分析,两分组之间行独立样本t检验。  结果:HE染色结果显示,实验组平均细胞数明显多于对照组(P<0.05)。Masson三色染色观察,可见实验组有较多被染成蓝色的胶原纤维,胶原量多且成片分布,分布较均匀,而对照组胶原量少且散在分布。Ki67免疫组化检测显示:两组均出现阳性棕色颗粒,每个样本随机选取切片的5个视野进行细胞计数,并行统计学分析,结果显示实验组Ki67阳性细胞数量明显高于对照组(P<0.05)。Ⅰ型胶原免疫组化染色结果显示:实验组Ⅰ型胶原蛋白表达量明显高于对照组。  结论:模拟微重力三维培养的hDPSCs在裸鼠体内增殖能力高于常规重力培养组。
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