【摘 要】
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目的:探讨慢病毒载体介导绿色荧光蛋白基因转染大鼠牙髓干细胞的理想条件及方法，并确定其转染后是否保持干细胞特性。 方法:通过改良酶消化法获得大鼠牙髓干细胞，对其免疫表
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目的:探讨慢病毒载体介导绿色荧光蛋白基因转染大鼠牙髓干细胞的理想条件及方法，并确定其转染后是否保持干细胞特性。 方法:通过改良酶消化法获得大鼠牙髓干细胞，对其免疫表型及分化潜能进行鉴定，以感染复数为5、10、25、50和100的负载绿色荧光蛋白的慢病毒作用24h和48h，倒置显微镜下检测转染率和荧光强度，并对大鼠牙髓干细胞转染前后的克隆增殖能力、细胞周期及牙向分化能力进行比较，评价转染对其生物学特性的影响。 结果:流式细胞仪检测结果显示大鼠牙髓干细胞STRO-1和CD146表达阳性，CD34和CD45表达阴性，经定向诱导培养后可向成骨和成脂分化。当感染复数为50，作用时间为48h时，转染效率最高，荧光表达最强;转染前后细胞增殖、克隆形成率及细胞周期等方面差异无显著性意义（P＞0.05），碱性磷酸酶阳性表达。 结论:说明感染复数为50作用48h是慢病毒载体介导绿色荧光蛋白基因转染大鼠牙髓干细胞的理想条件，且不影响牙髓干细胞生物学特性，为大鼠牙髓干细胞的体内研究提供了可靠的示踪方法。
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