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本文从以下两部分进行了阐述： 第一部分 焦虑症是最常见的持久性精神疾病，青春期的不良生活经历是重要的焦虑诱发因素。人和啮齿类动物大脑功能在青春期发育成熟，包括神经递质活动和受体表达、突触发育以及髓鞘形成，而最容易受到应激影响的海马、杏仁核和前额叶皮层等脑区也在青春期开始成熟。参与协调应激反应的神经通路在青春期仍在持续发育，在这段发育敏感时间内遭受应激，有可能改变对急性和慢性应激的HPA轴反应，很多研究表明青春期处于慢性应激会产生长期的行为和神经内分泌的影响。然而青春期慢性应激影响后代焦虑行为的机制尚不清楚，另外不同应激模型对后代焦虑行为的影响是否存在差异，表观遗传机制是否参与介导焦虑行为的改变，这都值得研究。因此我们选择了两种慢性应激模型：束缚应激和换群应激，对青春期雌鼠、雄鼠（PND26-28）分别进行了60天的慢性应激，探究青春期不同应激模型对后代焦虑行为的影响，并通过转录组测序和全基因组重亚硫酸盐测序技术揭示应激影响后代小鼠焦虑行为的表观遗传机制。结果表明：（1）束缚应激雄鼠或雌鼠均降低雌雄后代焦虑水平，升高后代海马糖皮质激素受体（GR）和脑源性神经营养因子（BDNF）基因表达量，降低血清皮质醇含量；（2）换群应激雄鼠或雌鼠均升高雌性后代焦虑水平，下调海马中GR和BDNF基因表达量，升高血清皮质醇含量，雄性后代不受影响；（3）两种应激方式处理公鼠后，取其雌性后代海马进行转录组测序。结果显示，较多的差异表达基因富集在免疫系统过程、炎症反应、应激反应以及刺激反应GO条目中，KEGG分析中显著富集通路主要为免疫及炎症反应相关通路；（4）两种应激方式处理公鼠后，取其雌性后代海马进行全基因组甲基化测序。结果表明，显著富集的GO条目主要涉及神经系统、学习、认知和记忆。KEGG分析显著富集通路主要为突触相关通路、长时程增强或抑制作用、轴突导向、神经营养因子信号相关通路；（5）通过两种分析方案进行转录组—DNA甲基化关联分析，分别得到11个和13个焦虑相关候选基因。 综上所述，我们得出结论：青春期不同慢性应激模型能够对后代焦虑行为产生不同影响，束缚应激降低雌、雄后代焦虑水平，换群应激升高雌性后代焦虑水平，但不影响雄性后代。并且雌性后代海马中焦虑相关基因的DNA甲基化是引起不同应激模型后代焦虑行为差异的主要因素之一。 第二部分 哺乳动物卵母细胞在排卵后停留在第二次减数分裂中期，如果不能及时完成受精过程，卵母细胞将发生时间依赖的老化过程。体外培养成熟卵母细胞也会发生老化。卵母细胞老化能够影响胚胎发育，因此抑制卵母细胞老化对于正常生殖和辅助生殖都有重要意义。然而排卵后卵母细胞老化的机制尚不明确，之前本实验室已经证明小鼠卵丘细胞通过分泌可溶性热敏感物质促进卵母细胞的老化，并且卵丘细胞在排卵后会发生时间依赖性的凋亡，释放FasL结合到卵母细胞上的Fas促进其老化。但体外添加FasL对卵母细胞老化的促进作用远不及卵丘条件化培养液，因此可能存在其他促进卵母细胞老化的可溶性因子。肿瘤坏死因子α（TNF-α）属于肿瘤坏死因子超家族，能够结合TNF受体诱导细胞凋亡。已经发现很多物种的卵巢中存在TNF-α及其受体，比如大鼠卵母细胞表达TNF-α，卵母细胞、颗粒细胞和间质细胞表达TNF受体。因此我们推测除了FasL以外，卵丘细胞还能分泌可溶性TNF-α与卵母细胞上的受体结合促进其老化。除了验证卵丘分泌TNF-α在卵母细胞老化过程中的作用，我们还将TNF-α与FasL对卵母细胞的老化促进作用进行了比较。结果表明：（1）小鼠卵丘细胞分泌可溶性TNF-α，其分泌能力随卵丘细胞凋亡水平的升高而增强，卵丘条件化36小时的培养液中老化的卵母细胞酒精激活率显著高于条件化24小时，并且体外老化卵母细胞中表达TNF-R1；（2）虽然卵母细胞老化过程中凋亡的卵丘细胞分泌等量的可溶性TNF-α和FasL，但TNF-α对老化指标的作用比等量的FasL更显著；（3）TNF-α-/-小鼠体外老化的COC酒精激活率显著低于野生型小鼠，siRNA干涉技术敲低卵丘细胞中的TNF-α表达后，其分泌的TNF-α对卵母细胞的老化促进作用减弱。 综上所述，我们得出结论：小鼠卵丘细胞通过分泌可溶性TNF-α促进卵母细胞老化，并且TNF-α的老化促进作用比FasL更显著。