1、长期盐度胁迫下耐盐蓝藻盐生隐杆藻抗氧化防御系统的变化2、香烟烟丝中微生物多样性的研究

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第一部分,盐生隐杆藻是在饱和NaCl条件下可以生存的少数几种耐盐蓝藻之一,本文研究了长期盐度胁迫对盐生隐杆藻细胞内丙二醛(脂质过氧化的产物)含量、两种非酶抗氧化剂(抗坏血酸和谷胱甘肽)含量以及四种抗氧化酶(超氧化物歧化酶、谷胱甘肽还原酶、抗坏血酸氧化酶和过氧化氢酶)活性的影响。与对照组(1 mol/L NaCl)相比,长期低盐胁迫(0.5、0.65和0.75 mol/L NaCl)和高盐胁迫(1.5,2、2.5和3 mol/L NaCl)都会抑制盐生隐杆藻的生长。丙二醛的含量在高盐和低盐迫状态下显著增加,这表明细胞内部出现了氧化伤害。随着盐胁迫程度的增加,非酶抗氧化剂含量和抗氧化酶(除了过氧化氢酶)活性不断增加,在3 mol/L NaCl的盐度下,超氧化物歧化酶、谷胱甘肽还原酶和抗坏血酸氧化酶的活性分别提高了395%、552%和184%,抗坏血酸和谷胱甘肽的含量分别增加了256%和134%;在0.5 mol/L NaCl的盐度下,超氧化物歧化酶、谷胱甘肽还原酶和抗坏血酸氧化酶的活性分别提高了200%、130%和174%,抗坏血酸和谷胱甘肽的含量分别增加了84%和136%。上述结果表明:在长期低盐胁迫和高盐胁迫下,盐生隐杆藻细胞内的抗氧化防御系统发生了显著变化,非酶抗氧化剂和抗氧化物酶水平的增加可以应对细胞内升高的氧化伤害,抗氧化防御系统可能在盐生隐杆藻对长期盐胁迫的耐受机制中发挥了重要作用。  第二部分,本文采用构建16S rDNA文库以及进行PCR-ARDRA分析的方法研究了牡丹和大前门两个品牌的香烟烟丝中的微生物多样性。在牡丹和大前门牌香烟烟丝细菌克隆库中分别随机挑取了52和65个克隆,经HinfⅠ和Csp6Ⅰ限制性内切酶处理,对酶切结果进行分析,结果发现:牡丹牌香烟中所分析的细菌菌群有11个OTU,94%的克隆与Pseudomonas相近,相似性最高达99%,Pseudomonassp.An1相似菌是细菌群体的优势类群,占总克隆数的79%,其他的细菌类群分别是假单胞菌属的Pseudomonas sp.S-JS-8、Pseudomonassp.BS1(2009)、Pseudomonas sp.BFXJ-8和Pseudomonas sp.NJU001,芽孢杆菌属的Uncultured Bacillus sp.clone CBFOS-01、土壤细菌Uncultured soil bacterium cloneF01_Pitesti、短波单胞菌属的Brevundimonas sp.CHNTR43;大前门牌香烟中所分析的细菌菌群有15个OTU,92%的克隆与假单胞菌属(Pseudomonas)相近,相似性高达98%以上,其中Pseudomonas sp.An1和Pseudomonas sp.NJU001相似菌为优势类群,分别占总克隆数的57%和32%,其他的细菌类群分别是草螺菌属的Uncultured Herbaspirillum sp.clone AV_8R-S-G10、芽球菌属的Blastococcus sp.BC521、短波单胞菌属的Brevundimonassp.CHNTR43、Uncultured bacterium clone D8S-36。实验结果显示,这两种烟丝菌群共涵盖了约6个种属,包括假单胞菌属(Pseudomonas)、革螺菌属(Herbaspirillum)、芽球菌属(Blastococcus)、短波单胞菌属(Brevundimonas)和芽孢杆菌属(Bacillus),两种未分属;牡丹和大前门牌香烟烟丝菌群都以假单胞菌属占优势,都以Pseudomonas sp.An1相似菌为优势菌株;不同之处在于大前门牌香烟烟丝中菌群除以Pseudomonas sp.An1相似菌为优势菌外,Pseudomonas sp.NJU001相似菌也占有较高的比例,因此也为优势菌;牡丹牌香烟烟丝菌群中含有Bacillus的菌,而大前门牌香烟烟丝菌群中没有;后者含有Herbaspirillum、Blastococcus两个属的菌,前者没有。本研究结果表明烟丝中的微生物具有丰富的多样性,可以为烟草品质的改善工作提供参考。
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